飼料中氨基酸的測定
閱讀:3646 發(fā)布時間:2020-4-2
方法原理:
1,、酸水解法
常規(guī)(直接)水解法是使飼料蛋白在110°C,、6mol/L鹽酸作用下,水解成單一氨基酸,,再經(jīng)離子交換色譜法分離并以茚三酮做柱后衍生測定,。水解中,色氨酸全部破壞,,不能測量,。胱氨酸和蛋氨酸部分氧化,不能測準(zhǔn),。氧化水解法是將飼料蛋白中的含硫氨基酸(胱氨酸,、半胱氨酸和蛋氨酸等)用過甲酸氧化,然后進(jìn)行酸解,,再經(jīng)離子交換色譜分離,、測定。水解中色氨酸被破壞,,不能測定,。酪氨酸在以偏重亞硫酸鈉做氧化終止劑時,被氧化,,不能測準(zhǔn),。酪氨酸、苯丙氨酸和組氨酸則坐終止劑時被氧化,,不能測準(zhǔn),。
2、堿水解法
飼料蛋白在110°C,、堿的作用下水解,,水解出的色氨酸可用離子交換色譜或高校反相色譜分離,、測定。
3,、酸提取法
飼料中添加的氨基酸以稀鹽酸提取,,再經(jīng)離子交換色譜分離、測定,。
儀器,、設(shè)備:
1、實(shí)驗(yàn)室用樣品粉碎機(jī)
2,、樣品篩:孔徑 0.25mm
3,、分析天平:感量0.0001g
4、真空泵與真空規(guī)
5,、噴燈或熔焊機(jī)
6、恒溫箱或水解爐
7,、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或濃縮器:可在室溫至65°C間調(diào)溫,,控溫精度±1°C,真空度可低至3.3×10三次方Pa
8,、氨基酸自動分析儀:茚三酮柱后衍生離子交換色譜儀,,要求各氨基酸的分辨率>90%
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