是一類很重要的分析儀器 ,,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量,。
應用:物理學,、化學,、生物學、醫(yī)學,、材料學,、環(huán)境科學等科學研究,化工,、醫(yī)藥,、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門,。
分光光度計的設計原理和工作原理,,允許吸光值在一定范圍內(nèi)變化,即儀器有一定的準確度和精確度,。如德國伯赫Colibri超微量分光光度計的準確度≤1.0%(1A),。這樣多次測試的結果在均值1.0%左右之間變動,都是正常的,。另外,,還需考慮核酸本身物化性質(zhì)和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,,離子濃度太高,,也會導致讀數(shù)漂移,因此建議使用pH值一定,、離子濃度較低的緩沖液,,如TE,可大大穩(wěn)定讀數(shù),。樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒,尤其是核酸樣品,。這些小顆粒的存在干擾測試效果,。為了大程度減少顆粒對測試結果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,,吸光值最好在0.1-1.5A,。在此范圍內(nèi),顆粒的干擾相對較小,,結果穩(wěn)定,。
混合要充分,否則吸光值太低,,甚至出現(xiàn)負值,;混合液不能存在氣泡,空白液無懸浮物,,否則讀數(shù)漂移劇烈,;必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品,,否則濃度差異太大;換算系數(shù)和樣品濃度單位選擇一致,;不能采用窗口磨損的比色杯,;樣品的體積必須達到比色杯要求的最小體積等。
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