毛細(xì)管電泳影響分離因素
1.緩沖液
緩沖試劑的選擇主要由所需的pH決定,，在相同的pH下,，不同緩沖試劑的分離效果不盡相同，有的可能相差甚遠(yuǎn),。CE中常用的緩沖試劑有：磷酸鹽,、硼砂或硼酸、醋酸鹽等,。
緩沖鹽的濃度直接影響到電泳介質(zhì)的離子強(qiáng)度,，從而影響Zeta電勢(shì),，而Zeta電勢(shì)的變化又會(huì)影響到電滲流,。緩沖液濃度升高，離子強(qiáng)度增加,，雙電層厚度減小,，Zeta電勢(shì)降低，電滲流減小,，樣品在毛細(xì)管中停留時(shí)間變長(zhǎng),，有利于遷移時(shí)間短的組分的分離,，分析效率提高。同時(shí),，隨著電解液濃度的提高,，電解液的電導(dǎo)將大大高于樣品溶液的電導(dǎo)而使樣品在毛細(xì)管柱上產(chǎn)生堆積的效果，增強(qiáng)樣品的富集現(xiàn)象,，增加樣品的容量,，從而提高分析靈敏度。但是,，電解液濃度太高,，電流增大，由于熱效應(yīng)而使樣品組分蜂形擴(kuò)展,，分離效果反而變差,。此外，離子還可以通過(guò)與管壁作用以及影響溶液的粘度,、介電常數(shù)等來(lái)影響電滲,，離子強(qiáng)度過(guò)高或過(guò)低都對(duì)提高分離效率不利。
2.pH值
緩沖體系pH的選擇依樣品的性質(zhì)和分離效率而定,，是決定分離成敗的一大關(guān)鍵,。不同樣品需要不同的pH分離條件，控制緩沖體系的pH值,，一般只能改變電滲流的大小,。pH能影響樣品的解離能力，樣品在極性強(qiáng)的介質(zhì)中離解度增大,，電泳速度也隨之增大,，從而影響分離選擇性和分離靈敏度。pH還會(huì)影響毛細(xì)管內(nèi)壁硅醇基的質(zhì)子化程度和溶質(zhì)的化學(xué)穩(wěn)定性,，pH在4-10之間,，硅醇基的解離度隨pH的升高而升高，電滲流也隨之升高,。因此,，pH為分離條件優(yōu)化時(shí)不可忽視的因素。毛細(xì)管
3.分離電壓
在CE中,，分離電壓也是控制電滲的一個(gè)重要參數(shù),。高電壓是實(shí)現(xiàn)CE快速、的前提,，電壓升高,，樣品的遷移加大，分析時(shí)間縮短，但毛細(xì)管中焦耳熱增大,，基線穩(wěn)定性降低,，靈敏度降低；分離電壓越低,，分離效果越好,，分析時(shí)間延長(zhǎng)，峰形變寬,，導(dǎo)致分離效率降低,。因此，相對(duì)較高的分離電壓會(huì)提高分離度和縮短分析時(shí)間,，但電壓過(guò)高又會(huì)使譜帶變寬而降低分離效率,。電解質(zhì)濃度相同時(shí)，非水介質(zhì)中的電流值和焦耳熱均比水相介質(zhì)中小得多,，因而在非水介質(zhì)中允許使用更高的分離電壓,。
4.溫度
溫度影響分離重現(xiàn)性和分離效率，控制溫度可以調(diào)控電滲流的大小,。溫度升高,，緩沖液粘度降低，管壁硅輕基解離能力增強(qiáng),，電滲速度變大,，分析時(shí)間減短，分析效率提高,。但溫度過(guò)高,，會(huì)引起毛細(xì)管柱內(nèi)徑向溫差增大，焦耳熱效應(yīng)增強(qiáng),，柱效降低,，分離效率也會(huì)降低。
5.添加劑
在電解質(zhì)溶液中加入添加劑,，例如中性鹽,、兩性離子、表面活性劑以及有機(jī)溶劑等,，會(huì)引起電滲流的顯著變化,。表面活性劑常用作電滲流的改性劑，通過(guò)改變濃度來(lái)控制電滲流的大小和方向,，但當(dāng)表面活性劑的濃度高于臨界膠束濃度時(shí),，將形成膠束。加入有機(jī)溶劑會(huì)降低離子強(qiáng)度,，Zeta電勢(shì)增大,，溶液粘度降低，改變管壁內(nèi)表面電荷分布,，使電滲流降低,。在電泳分析中，緩沖液一般用水配制,，但用水一有機(jī)混合溶劑常常能有效改善分離度或分離選擇性,。毛細(xì)管電泳處理軟件界面。
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