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廣譜型DNA免核酸提取試劑*
品牌:Labchant
產(chǎn)品貨號:M-DNA01
產(chǎn)品名稱:廣譜型DNA免核酸提取試劑
產(chǎn)品規(guī)格:1ml 50T
試劑盒應用
本試劑盒中采用*配方,能夠快速高效的裂解各種常見樣本,,無需反復離心,,通過裂解方式獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA無需進行純化可以直接用于PCR,、熒光定量PCR,、Lamp等擴增。
DNA-Lysis可用于全血,、血清,、唾液、腹水,、細胞,、組織(例如淋巴結(jié)、脾臟,、腎臟,、扁桃體、肺,、肌肉等),、拭子(例如血拭子、咽拭子),、鼠尾,、病毒、革蘭氏陽性菌,、大腸桿菌,、葡萄球菌以及環(huán)境樣本(例如擦拭物、水樣本,、鞋底)等樣品中基因組DNA的提取,。
本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品,、化妝品等領(lǐng)域,。
試劑盒組成
組分 | M-DNA01 |
DNA-Lysis | 1 mL |
廣譜型DNA免核酸提取試劑*保存條件
4ºC保存。使用前將DNA-Lysis室溫充分混勻(若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬正?,F(xiàn)象),。
需要準備
金屬恒溫浴、離心機
使用方法
一,、不同樣品的處理方法
1. 組織液的處理
(1)組織液包括組織研磨液,、傳代細胞懸液、血清,、唾液、尿液等,。取20 μL組織液置于離心管中,。
(2)取10 μL(1)中組織液,加入20 μL DNA-Lysis,。
(3)混勻,。
(4)置于55ºC加熱5分鐘。
(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清,。
注意:組織液為血液樣品時,提取獲得的DNA用于熒光定量PCR時,,需要將提取物按照1:40稀釋,。例如5μL 提取物加入195μL中。
2. 組織塊的處理
(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中,。
(2)用眼科剪取半顆米粒大小的組織塊(< 3 mm3),,并將組織塊剪成肉泥狀,放在(1)中溶液中,。
(3)混勻,。
(4)置于55ºC加熱5分鐘。
(5)12000rpm離心2-3分鐘,,取上清,。
3. 菌類的處理
(1)取20 μL DNA-Lysis放置在離心管中。
(2)用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分,,放在(1)中溶液中,。如果是培養(yǎng)液,取20μL放在(1)中溶液中,。
(3)混勻,。
(4)置于55ºC加熱5分鐘。
(5)12000rpm離心2-3分鐘,取上清,。
二,、在DNase free 的離心管中配制PCR反應體系
20 μL體系(推薦) | |
2×TaqMix(With Dye) | 10 μL |
Forward Primer (10 μM) | 1 μL |
Reverse Primer (10 μM) | 1 μL |
Template DNA | 3 μL |
ddH2O | 5 μL |
注意事項
(1)在進行大量樣品檢測時,可將本試劑盒的試劑預分裝到8聯(lián)PCR管,,用多通道移液器進行多樣本的處理,。
(2)取樣的細胞量應當適中,濃度不宜過高或過低,,處理后溶液應當以透明為宜,。擴增細胞DNA時,取2000個細胞以內(nèi)即可,;擴增病毒基因時需要根據(jù)病毒的滴度決定取樣的細胞數(shù)量,。
(3)樣品處理過程中應當防止交叉污染,推薦設(shè)置陰性樣品參與處理過程,,以檢測環(huán)境的污染,。
(4)PCR的退火溫度可根據(jù)引物的預測Tm值減去5℃,或者通過梯度PCR摸索較佳退火溫度,。
(5)用本試劑盒處理的樣品可于-20℃保存1個月,。
(6)為防止試劑盒污染,請勿將不同批號試劑盒混用,。
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