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NuSmart® 核酸直接釋放試劑盒:植物樣本提取的創(chuàng)新者
—— 告別液氮
植物樣本的傳統(tǒng)提取DNA或RNA之前都需要對樣本進(jìn)行液氮研磨破壞細(xì)胞壁,,這樣做的好處有以下幾點(diǎn):
1,、植物細(xì)胞具有堅(jiān)固的細(xì)胞壁,,特別是纖維素和木質(zhì)素等成分,,使用液氮研磨可以有效地破壞這些細(xì)胞結(jié)構(gòu),,使得細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA更容易釋放,;
2、低溫環(huán)境有助于減少核酸酶的活性,,提高核酸的提取質(zhì)量和產(chǎn)量,;
3、使樣本均勻破碎,,增加提取試劑與核酸的接觸面積,,提高核酸提取的效率;
4,、對于長片段研究時(shí),,更能保持完整性;
看來液氮研磨是bi不可少的步驟,,但是一旦樣本量成百上千,,液氮研磨就成為繁瑣的限速步驟,,而且液氮的溫度低至-196℃,,使用過程中極易誤傷,對實(shí)驗(yàn)室人員安全意識要求很高,??偨Y(jié)發(fā)現(xiàn)使用液氮有以下幾個缺點(diǎn):
1、溫度極低,,使用過程中需要佩戴手套和護(hù)目鏡,;
2、起始樣本量大一些,,避免研磨過程中損失,;
3、無法高通量操作,;
4,、無法自動化操作;
5,、操作需謹(jǐn)慎,,導(dǎo)致提取DNA時(shí)間延長數(shù)倍,;
那怎么辦呢?NuSmart®核酸直接釋放試劑盒來助力,,試劑盒中PL-DNA Lysis和葉片混合后,,55℃反應(yīng)5分鐘,DNA模板就制備好了,,操作流程見下圖,。整個操作流程非常簡單,wan全不用擔(dān)心液氮使用問題,,也不用擔(dān)心一天的效率太低,,提高整個工作效率。
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)的優(yōu)勢是什么?劃重點(diǎn)來了——
√對于小量和微量樣本十分友好
√操作簡單,,無需訓(xùn)練
√基因組完整性好
√無酶,、無有機(jī)試劑
√無大型設(shè)備投入
總結(jié)來說,NuSmart®核酸直接釋放試劑盒中不含有任何有毒,、易燃,、易爆成分,甚至無需佩戴手套即可取用,。
樣本量低對于分子生物實(shí)驗(yàn)室科研人員來說一直都是一個痛點(diǎn),,例如☆法醫(yī)鑒定的拭子含量都是微量
☆待分類細(xì)菌沒有合適的培養(yǎng)基培養(yǎng),產(chǎn)量很低
☆流式分選后細(xì)胞很少很少
之所以是痛點(diǎn),,主要是因?yàn)榘凑諏?shí)驗(yàn)室常用核酸提取方法只有離心柱提取法或者磁珠提取法,,這些方法都需要大量樣本支持。例如30mg組織,、106個細(xì)胞,、100mg水稻葉片、1mL血液等等,。這些條件成為下游實(shí)驗(yàn)的限速因素,。庫思擇開發(fā)的NuSmart®核酸直接釋放試劑盒對微量樣本非常友好,甚至一個細(xì)胞不在話下,。參考下圖,,使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus對一個細(xì)胞進(jìn)行處理后,可以有效擴(kuò)增長達(dá)4kb的基因,。
使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus(貨號Nu-C01)處理1個Sp2/0細(xì)胞,,使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增不同長度基因(分別0.5kb、1kb,、2kb,、3kb、4kb),。
總結(jié)來說無論樣本多少,,只要有完整結(jié)構(gòu),、有核酸NuSmart®試劑盒都能夠解決。
目前可以使用的樣本參考如下:
來源 | 范圍 |
細(xì)胞 | 293T,、A549,、Vero、PK15,、Sp2/0,、HCT-116、Marc145,、ST,、siHa、MCF-7 |
人 | 頭發(fā),、唾液,、咽拭子、全血,、精液,、腫瘤切片 |
小鼠 | 心、肝,、脾,、肺、腎,、腦,、脊柱、胃,、大腸,、小腸、膽囊,、尾巴,、腳趾,、皮,、耳朵、肌肉,、EDAT 抗凝血,、肝素鈉抗凝血、枸櫞酸鈉抗凝血 |
豬/雞/羊 | 心,、肝,、脾、肺,、腎,、淋巴結(jié),、精液、全血,、血清 |
亞洲鯽魚 | 魚鰭,、魚泡、魚鱗,、魚籽 |
病毒 | ASFV,、PRV、PPV,、PCV |
細(xì)菌 | 金黃色葡萄球菌,、大腸桿菌、農(nóng)桿菌,、結(jié)核桿菌,、糞腸球菌、鏈球菌 |
真菌 | 酵母菌,、曲霉菌,、犬小孢子菌、口蘑,、平菇,、白木耳 |
植物
| 煙草、擬南芥,、油菜,、水稻、大豆,、玉米,、小麥、棉花,、百脈根,、西紅柿、土豆,、茄子,、胡蘿卜、龍眼,、荔枝,、蘋果、香蕉,、葡萄 |
中草藥 | 鐵皮石斛,、丹參、益母草,、紅花,、紫草,、苦參、艾葉,、靈芝,、麥冬、金銀花,、淫羊藿,、茯苓、蒼術(shù),、白術(shù),、百合、半夏 |
其他微生物 | 支原體,、衣原體,、螨蟲、跳蟲 |
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