BioProE細胞凍存液（不含蛋白、DMSO和血清）使用方法

BioProE細胞凍存液基于控冰凍存技術,，由明確化學成分組成,，不含有胎牛血清和動物源成分、DMSO,、和其他蛋白質類物質,。自主研發(fā)控冰保護成分能夠使細胞復蘇后存活率達到90%以上。目前已驗證的常用細胞系包括CHO,、HEK 293,、NS-1、5637,、A549,、HUH7、HepG2,、VERO,、MDCK、293T,、marc-145,、pk-15。也可用于常見原代細胞的冷凍保存。

細胞凍存步驟

1,、常規(guī)方法收集對數(shù)生長期且細胞活率大于90%的貼壁細胞或懸浮細胞置于離心管中,。

2、根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細胞數(shù),。

3,、將離心管放入離心機中以1,000rpm的轉速離心5分鐘。離心后吸棄上清液,，保留細胞沉淀,。

4、加入1-2mL的細胞凍存液于離心管中,，使細胞濃度約為 5×10⁵ -1×10⁷ /ml,。輕柔地混勻細胞，制成細胞混合液,。

5,、分裝于已標記的凍存管中。

6,、直接放入-80℃超低溫冰箱中,，可保存一年。

7,、如果想長期保存,，需先放入-80℃冰箱至少一天時間，方可移至液氮罐中保存,。

凍存細胞復蘇步驟

1,、從-80℃冰箱或液氮中取出凍存的細胞，立即置于37℃水浴鍋中快速融化,。

2,、待凍存管中的細胞混合液wan全融化后轉移到無菌離心管中，立即加入等體積的細胞wan全培養(yǎng)基與細胞混合,，1,000rpm離心5分鐘,，移除上清液，收集細胞沉淀,。

3,、加入適量的wan全培養(yǎng)基，沿著管壁緩緩加入細胞沉淀中,，輕柔混勻,，將混勻好的細胞移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。

4,、鏡檢觀察,，待細胞狀態(tài)恢復后可進行其他研究或者培養(yǎng)處理,。