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NuSmart®核酸直接釋放技術在EDTA抗凝血中應用2
血常規(guī)檢測中最經(jīng)常使用的就是EDTA抗凝血,它能夠用于血細胞形態(tài),、生化檢測,、血型鑒定、標志物檢測,、基因篩查等,。常見的基因篩查都涉及到核酸提取和擴增。檢驗科或者實驗室最常使用的方法就是離心柱或者磁珠提取法進行DNA或者RNA提取,。但是以上方法有以下盲點:
1,、離心柱提取無法自動化,一次提取量受限于離心機規(guī)模,,而且無法高通量操作,;
2,、磁珠提取法雖然能夠高通量,但是設備昂貴,;
3,、離心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL;
4,、離心柱提取的核酸含量比較高,,而磁珠依據(jù)廠家不同得率不穩(wěn)定;
5,、前處理時間比較長,;
6、離心柱的批間差異相對于磁珠更好控制,;
綜上所述,,兩種方法各有優(yōu)缺點,在通量,、效率,、自動化上很難兩全。鑒于此情況,,我司開發(fā)的NuSmart®核酸直接釋放技術和EDTA血檢測相結合,,僅需要10-20抗凝血,同時可以處理百份甚至千份血液,。所含試劑中不包含有生物酶制劑,,例如蛋白酶K,所以批間差異很小,??偨Y如下:
— EDTA血量少
— 5分鐘處理
— 高通量樣本量
— 無腦操作
— 無需大型設備
操作流程
案例A 不同體積人EDTA抗凝血處理后擴增4對引物
1、0.1μL 2,、1μL 3,、10μL 4、20μL 5,、50μL 6,、100μL 7、200μL
使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒Plus(貨號Nu-B02)處理不同體積人EDTA抗凝血,,使用2×Master TaqMix(With Dye)分別擴增4對引物,。
案例B 人EDTA抗凝血處理后在50μL體系下擴增
1、1μL 2,、2μL 3,、5μL 4、10μL 5,、15μL 6,、20μL 7,、23μL
使用NuSmart®血液 PCR 試劑盒Plus(貨號Nu-B02)處理10μL人EDTA抗凝血。在50μL擴增體系中,,使用1μL到23μL模版體積擴增4對引物,。
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