ColProof^®質(zhì)粒小量提取試劑盒

Col-P0101

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用硅膠膜吸附技術(shù)，高效專一地結(jié)合質(zhì)粒DNA,，操作簡(jiǎn)單,、快速。一次可處理1-4mL過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)液,，最多可提取20µg質(zhì)粒DNA,。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA超螺旋含量高，適合酶切,、PCR,、測(cè)序、連接轉(zhuǎn)化,、文庫(kù)篩選,、體外轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn),。

本試劑盒僅供研究使用,，不可用于臨床、食品,、化妝品等領(lǐng)域,。

試劑盒組成

備注：

1,、第一次使用前，在洗滌液PW中加入48mL無(wú)水乙醇,，并標(biāo)記“√"和時(shí)間,，避免重復(fù)加入。

2,、若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前可在37℃水浴中預(yù)熱10分鐘溶解沉淀,。

3,、獨(dú)立包裝的RNaseA溶液可在室溫保存12個(gè)月，使用前全部加入溶液P1中,，混合均勻2-8℃保存6個(gè)月,。

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

無(wú)水乙醇

使用方法

1,、取1-4mL過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)菌,，加入離心管中,，12,000rpm離心1分鐘收集細(xì)菌,。盡可能去除上清。

2,、加入150μL溶液P1（使用前檢查是否已加入RNaseA溶液）至沉淀的離心管中,，使用移液器輕輕吹打或渦旋振蕩器懸浮菌體。

3,、向離心管中加入150μL溶液P2,，溫和上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。此時(shí)溶液變澄清,。

注意：溫和混合,，避免劇烈震蕩。

4,、沿管壁向離心管中加入350μL溶液P3,，快速上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻,，此時(shí)溶液出現(xiàn)絮狀沉淀,。

5、12,000rpm離心5-10分鐘,。

6,、轉(zhuǎn)移550-600μL上清液至吸附柱P中（提前將吸附柱P置于收集管中），盡可能不要吸取到沉淀,。

7,、12,000rpm離心30秒,。倒收集管中廢液，將吸附柱P放入收集管中,。

8,、加入500μL洗滌液PW（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000rpm離心30秒,。倒收集管中廢液,，將吸附柱P放入收集管中。

9,、重復(fù)步驟8一次,。

10、12,000rpm離心1分鐘將洗滌液PW去除,。

注意：盡可能將無(wú)水乙醇揮發(fā)wan全,。

11、將吸附柱P置于干凈的離心管中,，向吸附柱中間滴加50-100μL洗脫液PW,。

注意：洗脫液PW體積不低于50μL，以免影響回收效率,。為了提高洗脫效率,，可將洗脫液PW提前置于65℃水浴中再使用。

12,、12,000rpm離心1分鐘得到質(zhì)粒DNA溶液,。-20℃保存。