徠同生物 - 細(xì)胞周期－流式細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)（2025 年最新版）

技術(shù)原理

EdU（5-ethynyl-2' -deoxyuridine），中文全稱為 5 - 乙炔基 - 2' - 脫氧尿苷,，是一種新型的胸苷（即胸腺嘧啶脫氧核苷,，thymidine）類似物。在細(xì)胞進(jìn)行 DNA 合成的過程中,，EdU 能夠憑借其結(jié)構(gòu)特性,，替代胸苷摻入到新合成的 DNA 鏈中。

從化學(xué)反應(yīng)層面來看,，EdU 分子上的乙炔基具有du特的化學(xué)活性,，它能與經(jīng)過熒光標(biāo)記的小分子疊氮化物探針（例如 Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555,、Azide Alexa Fluor 594,、Azide Alexa Fluor 647 等），在一價銅離子的催化作用下發(fā)生高效的共價反應(yīng),，進(jìn)而形成穩(wěn)定的三唑環(huán)結(jié)構(gòu),。這一極為迅速的反應(yīng)，被科研領(lǐng)域稱作點(diǎn)擊反應(yīng)（Click reaction）,。

通過點(diǎn)擊反應(yīng),，新合成的 DNA 會被相應(yīng)的熒光探針特異性地標(biāo)記上。如此一來,，科研人員便可以借助合適的熒光檢測設(shè)備,，精準(zhǔn)地檢測到處于增殖狀態(tài)的細(xì)胞，從而為細(xì)胞周期和增殖相關(guān)的研究提供有力的技術(shù)支持,。

實(shí)驗(yàn)方法du

1. 細(xì)胞培養(yǎng)：精心挑選合適的細(xì)胞系,，按照其特定的生長需求，在適宜的細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)奠定良好的細(xì)胞基礎(chǔ)。

2. 轉(zhuǎn)染或藥物處理：根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計,，對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,，導(dǎo)入特定的基因片段；或者施加相應(yīng)的藥物處理,，以觀察細(xì)胞在不同條件下的反應(yīng),。

3. 加      EDU 試劑：在細(xì)胞處于合適的生長階段時，向培養(yǎng)體系中加入適量的 EDU 試劑,，使其能夠順利摻入到正在合成的 DNA 中,。

4. 細(xì)胞收集：待 EDU 摻入達(dá)到預(yù)期時間后，采用合適的方法收集細(xì)胞,，確保細(xì)胞的完整性和活性,，為后續(xù)的檢測做準(zhǔn)備。

5. 上機(jī)檢測：將收集到的細(xì)胞進(jìn)行必要的處理后,，置于流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測,，通過分析熒光信號來獲取細(xì)胞增殖的相關(guān)數(shù)據(jù)。