NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)在血液中應(yīng)用中的應(yīng)用和表現(xiàn)

NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)能夠在不使用機械力,、蛋白酶K,、氯仿/無水乙醇的條件下,，通過破壞細(xì)胞壁和/或細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)釋放細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)，進(jìn)一步破壞細(xì)胞核膜結(jié)構(gòu),，從而達(dá)到從全血或抗凝血中釋放核酸DNA的目的,。整個步驟如下圖：

使用NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)，只需要10μL甚至更少的抗凝血就能夠釋放出全部的基因組DNA,。而抗凝血中釋放的抑制物從不同程度降低PCR的靈敏度和準(zhǔn)確性,。不同的抗凝劑成分對PCR擴增也有強抑制，為了解決這一問題,，NuSmart^®血液PCR試劑盒添加有納米物質(zhì)吸附抑制物,，以幫助下游PCR、qPCR,、LAMP,、RPA、STR等順利完成,。

當(dāng)檢測量逐年遞增,，實驗室常用的提取方法不足以滿足臨床篩選需要，NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)應(yīng)運而生,，能夠解決低樣本量,，高檢測通量的問題。而且整個過程不使用蛋白酶K,，不使用有毒有害有機試劑,，無需配備高額設(shè)備即可完成。

—對樣本量要求低

—操作簡單快速

—室溫可處理

—不用液氮研磨

—不用離心

—不使用蛋白酶和有機試劑

案例 經(jīng)過處理的小鼠EDTA血和枸櫞酸鈉血擴增10對引物

1：小鼠EDTA血  2 小鼠枸櫞酸鈉血 +：柱提基因組陽性對照 -：陰性對照

使用NuSmart^®血液 PCR 試劑盒（貨號Nu-B01）處理小鼠EDTA抗凝血和枸櫞酸鈉抗凝血,，使用2×Master TaqMix(With Dye)擴增分別擴增10對引物,。