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NuSmart®核酸直接釋放試劑盒為植物樣本加持2024推薦
植物樣本的傳統(tǒng)提取DNA或RNA之前都需要對(duì)樣本進(jìn)行液氮研磨破壞細(xì)胞壁,,這樣做的好處有以下幾點(diǎn):
1,、植物細(xì)胞具有堅(jiān)固的細(xì)胞壁,特別是纖維素和木質(zhì)素等成分,,使用液氮研磨可以有效地破壞這些細(xì)胞結(jié)構(gòu),,使得細(xì)胞內(nèi)DNA/RNA更容易釋放;
2,、低溫環(huán)境有助于減少核酸酶的活性,提高核酸的提取質(zhì)量和產(chǎn)量,;
3,、使樣本均勻破碎,增加提取試劑與核酸的接觸面積,,提高核酸提取的效率,;
4、對(duì)于長(zhǎng)片段研究時(shí),,更能保持完整性,;
看來(lái)液氮研磨是不可少的步驟,但是一旦樣本量成百上千,,液氮研磨就成為繁瑣的限速步驟,,而且液氮的溫度低至-196℃,,使用過(guò)程中極易誤傷,對(duì)實(shí)驗(yàn)室人員安全意識(shí)要求很高??偨Y(jié)發(fā)現(xiàn)使用液氮有以下幾個(gè)缺點(diǎn):
1、溫度極低,,使用過(guò)程中需要佩戴手套和護(hù)目鏡,;
2、起始樣本量大一些,避免研磨過(guò)程中損失,;
3,、無(wú)法高通量操作;
4,、無(wú)法自動(dòng)化操作,;
5、操作需謹(jǐn)慎,,導(dǎo)致提取DNA時(shí)間延長(zhǎng)數(shù)倍,;
那怎么辦呢?NuSmart®核酸直接釋放試劑盒來(lái)助力,,試劑盒中PL-DNA Lysis和葉片混合后,,55℃反應(yīng)5分鐘,DNA模板就制備好了,,操作流程見(jiàn)下圖,。整個(gè)操作流程非常簡(jiǎn)單,wan全不用擔(dān)心液氮使用問(wèn)題,,也不用擔(dān)心一天的效率太低,,提高整個(gè)工作效率。
NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是什么?劃重點(diǎn)來(lái)了——
√對(duì)于小量和微量樣本十分友好
√操作簡(jiǎn)單,,無(wú)需訓(xùn)練
√基因組完整性好
√無(wú)酶,、無(wú)有機(jī)試劑
√無(wú)大型設(shè)備投入
總結(jié)來(lái)說(shuō),NuSmart®核酸直接釋放試劑盒中不含有任何有毒,、易燃,、易爆成分,甚至無(wú)需佩戴手套即可取用,。
樣本量低對(duì)于分子生物實(shí)驗(yàn)室科研人員來(lái)說(shuō)一直都是一個(gè)痛點(diǎn),,例如☆法醫(yī)鑒定的拭子含量都是微量
☆待分類細(xì)菌沒(méi)有合適的培養(yǎng)基培養(yǎng),產(chǎn)量很低
☆流式分選后細(xì)胞很少很少
之所以是痛點(diǎn),,主要是因?yàn)榘凑諏?shí)驗(yàn)室常用核酸提取方法只有離心柱提取法或者磁珠提取法,,這些方法都需要大量樣本支持。例如30mg組織,、106個(gè)細(xì)胞,、100mg水稻葉片、1mL血液等等,。這些條件成為下游實(shí)驗(yàn)的限速因素,。庫(kù)思擇開(kāi)發(fā)的NuSmart®核酸直接釋放試劑盒對(duì)微量樣本非常友好,甚至一個(gè)細(xì)胞不在話下,。參考下圖,,使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus對(duì)一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行處理后,可以有效擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)4kb的基因。
使用NuSmart®細(xì)胞和組織PCR試劑盒Plus(貨號(hào)Nu-C01)處理1個(gè)Sp2/0細(xì)胞,,使用2×Master TaqMix(With Dye)擴(kuò)增不同長(zhǎng)度基因(分別0.5kb,、1kb、2kb,、3kb,、4kb)。
總結(jié)來(lái)說(shuō)無(wú)論樣本多少,,只要有完整結(jié)構(gòu),、有核酸NuSmart®試劑盒都能夠解決。
目前可以使用的樣本參考如下:
來(lái)源 | 范圍 |
細(xì)胞 | 293T,、A549,、Vero、PK15,、Sp2/0,、HCT-116、Marc145,、ST,、siHa、MCF-7 |
人 | 頭發(fā),、唾液,、咽拭子、全血,、精液,、腫瘤切片 |
小鼠 | 心、肝,、脾、肺,、腎,、腦、脊柱,、胃,、大腸、小腸,、膽囊,、尾巴、腳趾,、皮,、耳朵、肌肉、EDAT 抗凝血,、肝素鈉抗凝血,、枸櫞酸鈉抗凝血 |
豬/雞/羊 | 心、肝,、脾,、肺、腎,、淋巴結(jié),、精液、全血,、血清 |
亞洲鯽魚(yú) | 魚(yú)鰭,、魚(yú)泡、魚(yú)鱗,、魚(yú)籽 |
病毒 | ASFV,、PRV、PPV,、PCV |
細(xì)菌 | 金黃色葡萄球菌,、大腸桿菌、農(nóng)桿菌,、結(jié)核桿菌,、糞腸球菌、鏈球菌 |
真菌 | 酵母菌,、曲霉菌,、犬小孢子菌、口蘑,、平菇,、白木耳 |
植物
| 煙草、擬南芥,、油菜,、水稻、大豆,、玉米,、小麥、棉花,、百脈根,、西紅柿、土豆,、茄子,、胡蘿卜,、龍眼、荔枝,、蘋(píng)果,、香蕉、葡萄 |
中草藥 | 鐵皮石斛,、丹參,、益母草、紅花,、紫草,、苦參、艾葉,、靈芝,、麥冬、金銀花,、淫羊藿,、茯苓、蒼術(shù),、白術(shù),、百合、半夏 |
其他微生物 | 支原體,、衣原體,、螨蟲(chóng)、跳蟲(chóng) |
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