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上海徠同生物科技有限公司

ColProof植物DNA快速提取試劑盒Col-D02產(chǎn)品應(yīng)用介紹

時間:2023-3-22閱讀:135
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試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用裂解液配方在10 分鐘內(nèi)完成植物葉片、種子等的裂解、提取和純化。提取對象包

括水稻、玉米,、小麥等作物,也包括多糖多酚類植物(例如棉花,、馬鈴薯,、鐵皮石斛等)。整個提

取過無需使用蛋白酶K 等酶類制劑,。提取DNA 可用于PCR,、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆,、文

庫構(gòu)建等,。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床,、食品,、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組分

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保存條件

室溫保存一年,。

自備材料

無水乙醇,、無DNase 和無RNase 離心管、β-巰基乙醇(選用),、RNaseA(10mg/mL,,或貨號QR0101)

使用方法

1. 液氮研磨新鮮植物樣本(如葉片,、種子,、花蕊約20-100mg),加入700μL 裂解液DP,,充分混勻,,

室溫靜置1 分鐘。

備注:多糖多酚類樣本,,每700μL 裂解液DP 中加入14μLβ-巰基乙醇,,從而提高RNA 得率。

2. (選做)加入5μL RNase A(10mg/mL),,室溫靜置5-10 分鐘,。

3. 加入0.5 倍體積無水乙醇,上下顛倒混勻,,12,000rpm 離心1 分鐘,。

4. 取700μL 上清加入DNA 吸附柱中,12,000rpm 離心30 秒,,倒掉收集管中廢液,。

5. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DWA,12,000rpm 離心1 分鐘,,倒掉收集管中廢液,。

6. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗滌液DWB,12,000rpm 離心30 秒,,倒掉收集管中廢液,。

7. 重復(fù)步驟6 一次。

8. 12,000rpm 離心2 分鐘,,倒掉收集管中廢液,。

9 將DNA 吸附柱放入新無DNase 和無RNase 離心管中,加入30-50μL 洗脫液P,室溫放置1 分鐘,。

10. 12,000rpm 離心2 分鐘,,得到DNA 溶液,-80℃保存,。

注意事項

1. 經(jīng)常更換手套,,防止DNA 污染。

2. 使用無DNase 無RNase 的吸頭和離心管,,防止DNA 降解,。

3. 常更換吸頭,防止交叉污染,。

4. 動作輕柔,,防止基因組DNA 斷裂。

5. 為了提高洗脫效率,,可提前將洗脫液P 置于65℃水浴后再使用,。


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