簡要描述:
RAW264.7高效轉染試劑是一種新開發(fā)的試劑,,用于將 DNA 和 siRNA 轉染到真核細胞系和各種原代細胞中。
簡要描述:
RAW264.7高效轉染試劑是一種新開發(fā)的試劑,,用于將 DNA 和 siRNA 轉染到真核細胞系和各種原代細胞中。
產品介紹
RAW264.7高效轉染試劑介紹:
進入細胞后可以被代謝的新型小分子多肽轉染試劑,對細胞無毒性,,不易出現(xiàn)細胞死亡,不激活細胞免疫機制,。其特點是非脂質體材料,,大小是80nm左右,由于形狀是圓形的,,不會對細胞有物理性損傷,,材料表面有特異性結合接頭,只特異性識別DNA,、RNA,,對血清成分(如細胞因子、蛋白,、內毒素等)不識別也不結合,;特異性接頭與核酸形成轉染復合物,轉染復合物通過細胞主動吞噬進入細胞,,進入細胞后可以被代謝的新型小分子多肽材料,,對細胞無內毒素影響,,不易出現(xiàn)細胞死亡。
一,、產品說明:
1,、產品名稱
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規(guī)格
貨號:AD600150
規(guī)格:1.5ml
3,、儲存條件
常溫運輸,,4℃保存,可保存兩年,,拒絕反復凍融,。
二、操作步驟
提前 1 天接種細胞:細胞匯合度在 60-80%左右,,再進行轉染,。
核酸復合物制備:將核酸與轉染試劑按照 1:1 關系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,,室溫靜 止 10-15 分鐘,。
在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復合物:根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復合物,并輕輕混勻,;細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清,。
細胞換液:轉染 24 小時后對細胞進行正常換液,懸浮細胞轉染過程中不用換液,。
分析結果:質粒 DNA 轉染 48-72 小時后熒光檢測轉染效率,,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選,,則在轉染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選,。siRNA 轉染后 9 小時熒光檢測轉染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達,。
三,、RAW264.7高效轉染試劑轉染效果圖和轉染條件分享
轉染細胞:RAW264.7細胞;
培養(yǎng)板:12孔板,;
轉染時間:48小時,;
轉染細胞起始數(shù)量: 電訊;
轉染試劑用量:電訊,;
轉染試劑:Zeta Life Advanced DNA RNA轉染試劑,;
培養(yǎng)細胞使用血清:Zeta Life,Z7180FBS-500超低內毒胎牛血清
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