描述

在研究和診斷中，PCR是一種檢測DNA是否存在的敏感方法,。PCR中使用的聚合酶經(jīng)常被E.coli DNA污染,。當檢測少量細菌DNA時，污染的DNA可能導致靈敏度降低和假陽性,。其他污染源可能是dNTPs,、緩沖體系、引物/探針,，以及操作過程中引入的DNA污染,。一般來說,，對細菌的檢測和分型采用16S或23S rDNA基因保守區(qū)段為靶點的廣譜范圍探針,。該方法對細菌DNA污染非常敏感，而大多數(shù)Master mix和聚合酶中都發(fā)現(xiàn)細菌DNA的痕跡,。當使用qPCR檢測或定量少量的細菌DNA時,，污染的E.coli DNA可能會導致假陽性結果。

為了解決這個問題,，我們開發(fā)出PCR去污染試劑盒,，既能去除Master mix中細菌DNA污染，又不影響PCR反應的靈敏度,。此外,，該試劑盒無RNase活性。

優(yōu)勢

1. 減少背景污染,，提高目標基因檢測下限,；

2. 不影響PCR檢測靈敏度；

3. 簡單易用,，操作方便,。

應用 1. 去除PCR及RT-PCR的mastermix中E.coli內源DNA污染及其他DNA污染；

2. 用于終點PCR和探針依賴的qPCR,；

3. 用于細菌檢測及基因分型,；

4. 用于古細菌DNA檢測。

組分及特性

dsDNase：雙鏈特異性DNA酶,，去除Master mix,、引物及探針等的污染DNA；

DTT：60℃條件下,，能夠不可逆滅活dsDNase,，確保模板DNA不被清除。

不降低反應靈敏度 DNA污染是高靈敏度應用面對的主要問題,。這些應用,，以低豐度DNA為目標檢測基因,，易受到污染DNA的干擾。因此,，任何影響PCR靈敏度的去除DNA污染的方法,，都是不能使用的。

Figure 2. 用PCR去污染試劑盒處理/未處理的mastermix,、5個10倍梯度稀釋的gDNA和水（NTC）為模板進行qPCR檢測,。與NTC untreated組相比，NTC decontaminated組在45個cycle仍然沒有信號,，說明PCR去污染試劑盒能程度去除mastermix中的污染,。PCR去污染試劑盒處理/后數(shù)據(jù)相比，Cq值并沒有明顯改變,，說明基本不影響反應靈敏度,。

訂購信息

ArcticZymes Technologies成立于20世紀80年代后期，總部位于挪威,。從海洋生物中識別新的冷適應酶,，用于分子研究、體外診斷和治療域,。