一、分子生物學(xué)平臺

1. 熒光定量PCR樣本收集運(yùn)輸

A.細(xì)胞：

a.貼壁細(xì)胞

以6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞為例,，吸掉培養(yǎng)基,，用PBS洗一次，吸掉PBS,，加1ml  Trizol,，將底部細(xì)胞吹打起來，轉(zhuǎn)入1.5mlEP管,，裂解細(xì)胞,。-80度凍存，干冰運(yùn)輸,。

b.懸浮細(xì)胞

將培養(yǎng)基及細(xì)胞轉(zhuǎn)入1.5 mLEP管，5000轉(zhuǎn)3 min離心,，離心完吸掉上清,，加1 mL  Trizol，吹打混勻,，裂解細(xì)胞,。-80度凍存，干冰運(yùn)輸。

c.貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞混合

將底部細(xì)胞吹打起來,，轉(zhuǎn)入1.5 mL EP管,，5000轉(zhuǎn)3 min離心，離心完吸掉上清,，加1 mL  Trizol,，吹打混勻，裂解細(xì)胞,。-80度凍存,，干冰運(yùn)輸。

B.組織：

客戶提供的組織,，質(zhì)量請勿低于100 mg,，約黃豆粒大小，可直接-80度凍存,，干冰運(yùn)輸,，也可加入1 mL Trizol后，再行-80度凍存,，干冰運(yùn)輸

C.骨類:

液氮條件下粉碎,，之后再加入1 mL Trizol研磨，-80度凍存,，干冰運(yùn)輸,。

D.其他形式樣本:

a.血清、血漿,、尿液樣本

請?zhí)峁┲辽?/span>1 mL樣本,；請?jiān)诓杉瘶颖緯r(shí)立即加入專&用trizol，推薦使用invitrogen公司的Trizol LS

該產(chǎn)品的使用比例為樣本體積：Trizol體積=1:3,。-80度凍存,，干冰運(yùn)輸。液體樣本不建議直接凍存,，請一定在采集樣本時(shí)加入專&用trizol再行凍存寄送,。

b.全血

新鮮抗凝全血，按照1:3加入1×紅細(xì)胞裂解液,，裂解10 min,，12000 轉(zhuǎn)3 min離心，倒掉廢液,，留存管底外周血單個(gè)核細(xì)胞沉淀,，加1 mL  Trizol，吹打混勻,，-80度凍存,，干冰運(yùn)輸,。

2.ELISA/生化檢測樣本收集運(yùn)輸

(1) 組織樣品：黃豆粒大小組織樣本，凍存,，低溫液氮或干冰運(yùn)輸,。

(2) 血清 24小時(shí)內(nèi)處理：全血樣品于室溫放置2h或4℃靜置過夜，1000 r/min離心20 min,，取上清待測,。

(3) 血漿 24小時(shí)內(nèi)處理：用抗凝管收集血樣或往血樣品中加抗凝劑，1000 r/min離心15 min,，取上清待測,。

(4) 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清1000 r/min離心20 min，取上清待測,。

(5) 其他液體樣品 如尿液,，透析液等 ：1000 r/min離心20 min，取上清待測,。

注意：

a.樣品處理后的上清可-20℃保存1個(gè)月或-80℃保存6個(gè)月,；

b.如果取得上清比較渾濁,可稍微提高轉(zhuǎn)速將上清再次離心。

二,、Western Blot平臺

1.樣本種類

細(xì)胞 ,、動(dòng)物組織如心、肝,、脾,、肺、腎,、胰,、角膜、血管,、脊髓,、腦等

2.樣本收集

(1)組織樣本：

客戶提供的組織，質(zhì)量請勿低于100 mg,，約黃豆粒大小,，可-20度凍存，干冰運(yùn)輸,。

(2)細(xì)胞樣本：

a．貼壁細(xì)胞,，數(shù)量不低于1*10^6個(gè)，將細(xì)胞用胰酶消化下來轉(zhuǎn)入EP管,，5000 rpm離心3 min,，去上清，加入1 mLPBS重懸后轉(zhuǎn)入新的1.5 mL EP管中,，5000 rpm離心3 min，去上清后，PBS再次洗滌一次,，留取細(xì)胞沉淀,，-20℃保存，干冰運(yùn)輸,。

b．懸浮細(xì)胞,，數(shù)量不低于1*106個(gè)，將培養(yǎng)基及細(xì)胞轉(zhuǎn)入EP管,，5000 rpm離心3 min,，去上清，加入1 mL PBS重懸后轉(zhuǎn)入新的1.5 mL EP管中,，5000 rpm離心3 min,，去上清后，PBS再次洗滌一次,，留取細(xì)胞沉淀,，-20℃保存，干冰運(yùn)輸,。

(3)蛋白樣本：

客戶自己提取好的蛋白樣本,，蛋白濃度應(yīng)不低于2 μg/μl，-20℃保存,，干冰運(yùn)輸,。

三、細(xì)胞平臺

1.活細(xì)胞

加滿培養(yǎng)基,；用不透氣培養(yǎng)瓶,；常溫或4℃運(yùn)輸；培養(yǎng)瓶外用自封袋給予包裝,；細(xì)胞量在60-80%為宜,；快遞最好能在2天內(nèi)到貨；

2.凍存細(xì)胞

干冰運(yùn)輸,，最好提供2管凍存細(xì)胞,。

注意：

a.凡是需要我司進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞都要求無菌；

b.直接實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞必須保證細(xì)胞量,；

c. 流式檢測的細(xì)胞須告知是否攜帶有熒光標(biāo)記,。

四、病理學(xué)平臺

1. 常規(guī)病理樣本

(1)固定樣本：

a.取材后立即固定,，固定時(shí)間超過半年的樣本做免疫組化或免疫熒光效果可能不好,；

b.固定液體積至少為組織5倍以上，灌注固定的組織除外,；

c.業(yè)務(wù)員對于客戶組織的最終包埋切面要問詢清楚,，如果溝通不清楚可以當(dāng)場給技術(shù)員電話讓技術(shù)員跟客戶溝通清楚是否可以達(dá)到客戶要求,，或者將客戶樣本取回讓技術(shù)員看到樣本后再跟客戶進(jìn)行細(xì)節(jié)溝通；

d.固定好的組織只能放在常溫或4度冰箱保存,，絕不能放在-20度冰箱保存,； e. 如果現(xiàn)場驗(yàn)視客戶組織樣本處理不符合處理標(biāo)準(zhǔn)，如有的組織外觀破爛不完整,，包埋切片后達(dá)不到客戶要求,，要當(dāng)場給客戶說明不能接收；

(2)蠟塊：

取樣時(shí)跟客戶核對清楚蠟塊數(shù)量,，常溫運(yùn)輸,；

(3)石蠟切片：

a.石蠟切片的保存與運(yùn)輸條件為常溫或4度。

b.玻片應(yīng)用專&用的盒子裝好,，并固定,，避免運(yùn)輸過程中切片碎掉；

2. 透射電鏡樣本

(1)組織樣本：

取材時(shí)應(yīng)盡可能小,，一般要求米粒大小,，取材后立即用2.5%戊二醛或電鏡專&用固定液固定，4℃保存,，不可常溫或冰凍保存,，運(yùn)輸過程中應(yīng)加入冰袋，且避免樣本與冰袋直接接觸,；

(2)細(xì)胞樣本：

細(xì)胞量要求1*106個(gè),，細(xì)胞消化離心后轉(zhuǎn)移至1.5 mLEP管，PBS洗3遍后棄去PBS,，向細(xì)胞沉淀中加入1 mL 2.5%戊二醛或電鏡專&用固定液,，然后輕輕將細(xì)胞沉淀吹散，4℃保存,，不可常溫或冰凍保存,，運(yùn)輸過程中應(yīng)加入冰袋，且避免樣本與冰袋直接接觸,；

3. 抗體

(1)一抗的運(yùn)輸條件為4度冰盒運(yùn)輸,；

(2)二抗及二抗試劑盒的運(yùn)輸條件為4度冰盒運(yùn)輸；

(3)若客戶提供的一抗種屬來源不是大鼠,、小鼠,、兔、山羊,，則需要客戶提供對應(yīng)的二抗,。