Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試

 Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試全面了解線粒體功能

1,、實(shí)驗(yàn)背景

 安捷倫 SeahorseXF 細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試通過(guò)在 Seahorse XFe 和 XF 細(xì)胞外流量分析儀上直接測(cè)量細(xì)胞的氧消耗速率（OCR）來(lái)表征線粒體功能的關(guān)鍵參數(shù)。它是基于培養(yǎng)板的活細(xì)胞實(shí)驗(yàn),，能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè) OCR,。   

   實(shí)驗(yàn)使用 XF 傳感器探針板內(nèi)置的加藥孔在實(shí)驗(yàn)過(guò)中將呼吸作用的調(diào)節(jié)劑加入細(xì)胞孔中，從而得到反映線粒體功能的關(guān)鍵參數(shù),。實(shí)驗(yàn)試劑盒里的調(diào)節(jié)劑為寡霉素（Oligomycin）,，羰基氰-4（三氟甲氧基）苯腙（Carbonyl cyanide-4 (trifluoromethoxy)Phenylhydrazone，F(xiàn)CCP）,，魚(yú)藤酮（Rotenone）,。

Seahorse XF 細(xì)胞線粒體壓力測(cè)試詞匯表：

• 基礎(chǔ)呼吸（Basal respiration）：用來(lái)滿足細(xì)胞ATP需求和線粒體質(zhì)子滲漏的氧消耗。表示細(xì)胞在基礎(chǔ)條件下的能量需求,。

• ATP產(chǎn)生（ATP Production）：加入ATP合酶抑制劑寡霉素后減少的氧氣消耗速率,，代表基礎(chǔ)呼吸中被用來(lái)驅(qū)動(dòng)ATP產(chǎn)生的部分。表示用來(lái)滿足細(xì)胞能量需求的線粒體ATP產(chǎn)生,。

• H+（質(zhì)子）滲漏（H+ (Proton) leak）：與 ATP產(chǎn)生不偶聯(lián)的基礎(chǔ)呼吸的剩余部分,。質(zhì)子滲漏可以被看作是線粒體損傷的標(biāo)志，也可被看作是一種調(diào)節(jié)線粒體ATP產(chǎn)生的機(jī)制,。

• 最大呼吸（Maximal respiration）：加入解偶聯(lián)劑FCCP之后獲得的最大氧氣消耗速率,。FCCP通過(guò)刺激呼吸鏈以最大能力運(yùn)轉(zhuǎn)模擬生理的“能量需求"，導(dǎo)致底物（糖,，脂肪和氨基酸）的快速氧化以應(yīng)對(duì)這一代謝挑戰(zhàn),。顯示細(xì)胞能夠達(dá)到的最大呼吸速率。

• 備用呼吸能力（Spare respiratory      capacity）：這個(gè)測(cè)量指標(biāo)表示細(xì)胞應(yīng)對(duì)能量需求的能力以及細(xì)胞呼吸與其理論最大值的差距。細(xì)胞應(yīng)對(duì)能量需求的能力可作為細(xì)胞適應(yīng)性或靈活性的一個(gè)指標(biāo),。

• 非線粒體呼吸（Nonmitochondrial      respiration）：加入魚(yú)藤酮后,，由于一部分細(xì)胞中的酶繼續(xù)消耗氧而存留的氧消耗。這對(duì)于線粒體呼吸的準(zhǔn)確測(cè)量很重要,。

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