透射電鏡制備注意事項(xiàng)(細(xì)胞)

1,、細(xì)胞數(shù)量: > 1*10的6次方;

2、消化細(xì)胞時(shí)要注意不要過(guò)度,，及時(shí)用含血清的培養(yǎng)液終止消化;

3,、終止消化后，預(yù)冷的PBS (pH 7.4 )洗細(xì)胞1-2次離心(1500rpm, 5min)棄上清(細(xì)胞收集在1.5ml的EP管中) ;

4,、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制該溶液),，可用吸管輕輕吹散細(xì)胞，使細(xì)胞懸浮于固定液中;

5,、4度固定過(guò)夜后寄出 (寄送時(shí)加冰袋,，并用2.5%戊二醛溶液將EP管中剩余空間充滿(mǎn))。

腎臟組織樣本制備步驟：

1,、迅速取材,；2、PBS漂洗2次,，切成小塊（米粒大?。?,、快速放入2.5%戊二醛固定液中,，4度固定過(guò)夜；4,、固定液將整個(gè)容器里面的空間都充滿(mǎn),，封口膜封口；5,、多加冰袋運(yùn)輸,。