很多人在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)遇到各種各樣的小問(wèn)題,，現(xiàn)徠同生物針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)常會(huì)遇到幾個(gè)問(wèn)題進(jìn)行一下分析：

1、細(xì)胞傳代時(shí)間比以前細(xì)胞正常傳代時(shí)間長(zhǎng),，比如以前傳代需要一天現(xiàn)在傳代需要1.5天或者2天,；

2、細(xì)胞在傳代過(guò)程中細(xì)胞形態(tài)產(chǎn)生變化,，比如以前細(xì)胞正常形狀是圓形的現(xiàn)在是梭形或者細(xì)胞變瘦,；

3、細(xì)胞溶液中有小黑點(diǎn),。

上述原因出現(xiàn)有下面兩組主要原因構(gòu)成：A 支原體污染   B血清營(yíng)養(yǎng)不夠

A,、支原體污染 判斷方案

同一個(gè)培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)瓶里面的細(xì)胞  在顯微鏡下逐個(gè)觀察如果有80%的細(xì)胞有小黑點(diǎn)可以判斷是支原體污染；

50%一下的細(xì)胞有小黑點(diǎn),， 可以判斷不是支原體污染而是血清營(yíng)養(yǎng)不夠引起的細(xì)胞有小黑點(diǎn),。

B、血清營(yíng)養(yǎng)不夠判斷方案

除過(guò)上述支原體污染原因外,，細(xì)胞溶液中出現(xiàn)小黑點(diǎn)的主要原因就是培養(yǎng)細(xì)胞的血清營(yíng)養(yǎng)不夠,；

血清營(yíng)養(yǎng)不夠會(huì)引起細(xì)胞過(guò)渡性分泌或者細(xì)胞碎片脫落，這些脫落物是形成小黑點(diǎn)的主要原因,。

不規(guī)范血（假血清,、國(guó)內(nèi)灌裝血清）清對(duì)下游實(shí)驗(yàn)的影響：

因?yàn)閲?guó)內(nèi)自然環(huán)境影響（霧霾））加上牛吃的草中有農(nóng)藥殘留,，飼料中過(guò)度性的促進(jìn)牛生長(zhǎng)的添加劑,，會(huì)引起牛血液中分泌對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)可能有害的蛋白因子,，從而引起科研者研究的目標(biāo)蛋白在細(xì)胞的表達(dá)量或者趨勢(shì)不對(duì)或者不表達(dá)；這個(gè)情況經(jīng)常在WB實(shí)驗(yàn)中發(fā)生（研究的目標(biāo)蛋白趨勢(shì)不對(duì)或者不表達(dá)）,；

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