供貨周期 | 一個月以上 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,食品/農(nóng)產(chǎn)品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁 |
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產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
I-Blue 中量質(zhì)粒提取試劑盒(無內(nèi)毒素)使用預(yù)裝的陰離子交換樹脂柱從50-150 ml培養(yǎng)的細(xì)菌中純化質(zhì)粒DNA,。試劑盒中包含I-Blue裂解緩沖液 Lysis Buffer(可選的顏色指示),,以防止常見的操作錯誤,,從而確保有效的細(xì)胞裂解和SDS沉淀,。在重新懸浮步驟中添加了I-Blue裂解緩沖液,然后添加了PM2緩沖液,。加入PM2緩沖液后,,在混合過程中,樣品將*變成藍色時,,樣品將開始變成藍色。無色區(qū)域或棕色團塊表明裂解不*,,應(yīng)繼續(xù)混合直至樣品*變藍,。在中和步驟中,添加PM3緩沖液,,劇烈搖動試管將開始使樣品變回中性色,。一旦樣品*無色,中和就完成了?,F(xiàn)在可以添加PER緩沖液以去除內(nèi)毒素?,F(xiàn)在可以完成純化質(zhì)粒DNA的結(jié)合,洗滌和洗脫,。
由于分離柱的高效率,,整個過程無需超速離心機,HPLC或其他有毒試劑,,即可在80分鐘內(nèi)完成,。純化的質(zhì)粒DNA適用于轉(zhuǎn)染,測序反應(yīng),,酶連接,,PCR,體外轉(zhuǎn)錄,,顯微注射,,限制性內(nèi)切酶切和基因槍。
通過從50 ml過夜培養(yǎng)的E.coli(DH5α)中分離質(zhì)粒DNA,,逐批測試了無內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒的質(zhì)量,。大腸桿菌(DH5α)培養(yǎng)物,,含有pBluescript(A600> 2U / ml)。經(jīng)過純化過程,,產(chǎn)量超過250 µg,,A260 / A280比在1.8-2.0之間。純化的質(zhì)粒(1 µg)用于EcoRI消化,,并通過電泳進行分析,。