qPCR熒光定量PCR儀,,由熒光定量系統(tǒng)和計算機組成,,用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光,。與實時設(shè)備相連的計算機收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示,。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數(shù)的圖表,。原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設(shè)備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進行正?;幚韥韽浹a背景熒光的差異,。正常化后可以設(shè)定域值水平,,這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平,。
樣品到達域值水平所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)稱為Ct值(限制點的循環(huán)數(shù))。域值應(yīng)設(shè)定在使指數(shù)期的擴增效率為大,,這樣可以獲得準確,,可重復性的數(shù)據(jù),。如果同時擴增的還有標有相應(yīng)濃度的標準品,線性回歸分析將產(chǎn)生一條標準曲線,,可以用來計算未知樣品的濃度,。
qPCR熒光定量PCR儀的功能:
1、該儀器采用6組反應(yīng)模塊,,每組模塊可以獨立控溫,,相鄰兩個模塊的大設(shè)置溫差達5℃;可獨立設(shè)置不同的退火溫度,;
2,、每組反應(yīng)模塊可以獨立完成16個PCR反應(yīng),一次PCR中可使用6對不同的引物,,相當于分別在6個Blocks上進行PCR擴增,;
3、qPCR熒光定量PCR儀具有USB記憶棒插槽,,用于轉(zhuǎn)移程序,,存儲不限數(shù)量的程序;
4,、熱蓋設(shè)計:熱蓋溫度可調(diào),,無需加石蠟油;
5,、顯示屏:6.5英寸VGA彩色觸摸式顯示屏,,大的導航按鈕設(shè)置參數(shù)簡單方便,無須使用觸摸屏筆或鼠標,;
6,、以太網(wǎng)聯(lián)結(jié),可同時聯(lián)結(jié)11臺同類型PCR儀進行同一反應(yīng),;
7,、軟件:可執(zhí)行Touchdown及套式PCR程序,主機自帶Tm值計算軟件,,可自動計算引物解鏈溫度,;
8、有多種診斷程序以檢測儀器升降溫速度和升降溫精度,,以便對儀器進行實時檢測診斷,。
9、自動再啟動功能可使斷電后恢復供電時PCR程序自動繼續(xù)執(zhí)行,,無需再重新進行程序設(shè)定
10,、具有斷電自動保護功能,斷電后程序可以自動保存,。