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在細胞培養(yǎng)中遇到培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦

閱讀:3480        發(fā)布時間:2019/8/22
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    細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌,、適宜溫度,、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存,、生長,、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)看重的就是無菌操作,,無菌操作是細胞培養(yǎng)是否成功的關(guān)鍵點,。凡是放入超凈臺中的不是一次性使用的物品事先都需要經(jīng)過高壓滅菌;不能進行高壓處理的物品也需要經(jīng)過75%的乙醇消毒,。包括酒精燈,、吸管、移液器,、試管架,、培養(yǎng)皿、廢液缸等,。

培養(yǎng)液pH值變化太快,怎么辦,?

可能造成的原因:

1.CO2張力不對,;

2.培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊;

3.NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖力不足,;

4.培養(yǎng)液中鹽濃度不正確,;

5.細菌、酵母或真菌污染,。

解決方法:

1.按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,,2.0g/L3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5%到10%或者改用不依賴CO2培養(yǎng)液

2.松開瓶蓋1/4

3.HEPES緩沖液至1025mM終濃度

4.CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Hanks鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks鹽配制的培養(yǎng)液

5.丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌

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