化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
培養(yǎng)基模擬灌裝試驗對無菌操作的工藝評價
閱讀：40 發(fā)布時間：2025-1-20評價一個無菌工藝的操作能力最有用的方法是工藝模擬試驗,，及培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。過往對培養(yǎng)基模擬灌裝試驗僅僅關(guān)注無菌灌裝階段,，沒有對可能影響無菌終產(chǎn)品質(zhì)量的無菌操作工藝評價,，因此現(xiàn)行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗主要目的是評估在既定無菌生產(chǎn)環(huán)境和過程控制條件下生產(chǎn)無菌產(chǎn)品的能力,、證明的無菌工藝設(shè)計和變更是否可行、證明無菌工藝過程中的相關(guān)操作是否可行,、評估無菌工藝人員的操作水平,、發(fā)現(xiàn)無菌工藝過程中潛在的微生物污染因素,、以及對現(xiàn)行GMP要求的合規(guī)能力。
培養(yǎng)基模擬灌裝應(yīng)盡可能地模擬產(chǎn)品本身所經(jīng)歷的與設(shè)備接觸的表面,、容器密封系統(tǒng)、關(guān)鍵環(huán)節(jié)和關(guān)鍵工藝操作的接觸,，根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝類型,，
無菌生產(chǎn)工藝的模擬灌裝操作步驟,，因凍干粉針劑無菌生產(chǎn)工藝是相對齊全的無菌生產(chǎn)工藝，下面以此為例,，簡介一下培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的關(guān)注點,。
培養(yǎng)基模擬灌裝試驗主要應(yīng)關(guān)注以下內(nèi)容但不是全部，生產(chǎn)線的狀態(tài),、試驗的頻率、培養(yǎng)基類型,、灌裝持續(xù)時間,、灌裝的數(shù)量、容器（西林瓶）體積,、生產(chǎn)線速度、灌裝體積,、挑戰(zhàn)性試驗、培養(yǎng),、結(jié)果與評級,、清場和清洗,、模擬灌裝中的有效期等。
生產(chǎn)線的狀態(tài)和試驗的頻率,，新生產(chǎn)線確認期間每個班次至少執(zhí)行3次連續(xù)的符合要求的試驗；持續(xù)性生產(chǎn)線按照每班次和工藝每年重復(fù)2次,；生產(chǎn)線在退役前,，進行一次無菌灌裝；以下變更情況需要進行再驗證,，生產(chǎn)線發(fā)生重大改變、直接接觸產(chǎn)品的設(shè)備,、容器改變,、參與生產(chǎn)的主要生產(chǎn)人員改變,。
培養(yǎng)基類型應(yīng)基于產(chǎn)品的劑型，選擇的培養(yǎng)基應(yīng)能夠支持較寬泛的微生物,，最好能符合內(nèi)部種屬；澄清度應(yīng)以便于輕松的觀察到渾濁為宜,、濃度應(yīng)當遵循供應(yīng)商建議的濃度,、若無菌生產(chǎn)過程中使用了過濾器，培養(yǎng)基應(yīng)能夠通過生產(chǎn)過程同一級別的過濾器過濾為準,，如需稀釋過濾,，培養(yǎng)基濃度應(yīng)提供微生物生長能力驗證,；同時培養(yǎng)基料液應(yīng)能滿足全部覆蓋生產(chǎn)設(shè)備。
灌裝持續(xù)時間對于初始性驗證,，培養(yǎng)基灌封實驗應(yīng)安排在一周內(nèi)的不同時間進行；對于再驗證,，可選擇在一周結(jié)束或其它最差條件下進行,；灌封時間要涵蓋實際生產(chǎn)班次；持續(xù)時間應(yīng)根據(jù)設(shè)置操作和干預(yù)活動所需時間,，以及實際無菌操作時間來確定,；大批量模擬灌裝時，可使用一些空白樣品（空的或灌水）以維持模擬實驗的動態(tài)環(huán)境,；人工灌裝或密封操作的持續(xù)時間應(yīng)不短于實際生產(chǎn)工藝整個流程；持續(xù)試驗應(yīng)涵蓋凍干工藝中,，模擬未密封的容器置于部分抽真空的腔體,，注意避免導(dǎo)致培養(yǎng)基沸騰,、冷凍或凍干步驟，確保培養(yǎng)基保持在好氧的狀態(tài)以降低微生物的抑制性,。
灌裝的數(shù)量的影響因素有實際批量、干預(yù)操作的類型,、數(shù)量,、時間,、開放/隔離廠房的類型，應(yīng)當足以模擬商業(yè)化生產(chǎn)條件并評估商業(yè)化批次污染的可能性,，小批次應(yīng)當至少等于產(chǎn)品數(shù)量,，指南未對最大批次（≥5000支）做出規(guī)定，通?？山邮艿钠瘘c是5000至10000支。
容器（西林瓶）體積應(yīng)當考慮灌裝容器的尺寸（最大容器和最小容器）,，最初的試驗中,，可以選用二次最大容器,，第三次選用最小容器。最大容器（通常由于灌裝量較大而導(dǎo)致最慢的灌裝速度）,，通常開口較大，所以環(huán)境中微生物侵入的潛在風(fēng)險較大,；最小容器（通常由于灌裝量較小而導(dǎo)致最快的灌裝速度）,，體現(xiàn)了最大的操作難度,；小的容器容易破碎，穩(wěn)定性較差,，在設(shè)備中更容易破裂和堵塞；日常的評估中,，其他尺寸的容器也應(yīng)包括在驗證計劃中,；不能使用琥珀色的瓶子，而應(yīng)使用透明瓶子,，以便可以目視檢查到微生物的生長。
生產(chǎn)線速度應(yīng)包括實際生產(chǎn)過程的灌裝速度范圍,，灌裝生產(chǎn)線的驗證中,，一次可以選用速度,，另外兩次可以選用最高速度；正常的培養(yǎng)基模擬灌裝應(yīng)包含了最大和最小的生產(chǎn)速度,。
灌裝體積不需要與現(xiàn)實中常規(guī)裝量一致,；但應(yīng)有足夠的灌裝量，可以充分接觸到容器的密封件的表面,，并且足以目視檢測到微生物的培養(yǎng)后的生長情況,。
挑戰(zhàn)性試驗基于日常生產(chǎn)的干擾,，如工作班次輪換、監(jiān)測活動,、灌裝線裝配,、稱量調(diào)節(jié),、加膠塞、處理倒瓶,、取樣,、環(huán)境監(jiān)測等日常干擾；設(shè)備故障,、灌裝線堵塞、膠塞堵塞,、軌道調(diào)節(jié),、拆卸/替換破損的部件等非日常干擾。
培養(yǎng)時容器必須倒置或旋轉(zhuǎn)確保所有表面，包括容器內(nèi)表面,，*接觸培養(yǎng)基,；對灌有培養(yǎng)基的容器進行培養(yǎng)后目視檢查其微生物的生長；應(yīng)經(jīng)過批準的規(guī)程檢查受污染安瓿的完整性以了解是否有容器或密封件損壞的證據(jù),；目檢應(yīng)該由有資質(zhì)的人員進行
結(jié)果范圍應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)要求；結(jié)果評價對可確定污染來源時,，不管是否超出了警戒線或行動限,，都應(yīng)該將所有收到的污染的微生物至少標識至屬，最好標識至種,；對于所有試驗規(guī)模，微生物污染的間歇性事故可能暗示存在有應(yīng)當進行調(diào)查的低級別污染,。對嚴重的失效的調(diào)查應(yīng)該包括對自從上一次成功的培養(yǎng)基灌裝以來生產(chǎn)的批次的無菌保證影響,。
清場和清洗應(yīng)當在培養(yǎng)基灌裝結(jié)束后采取妥善措施保證培養(yǎng)基灌裝驗證不會對后續(xù)的生產(chǎn)帶入污染的風(fēng)險,；培養(yǎng)基有合適的處理方法,。
培養(yǎng)基灌裝實施中效期應(yīng)關(guān)注灌裝或分裝設(shè)備,、部件、儲罐,、無菌物料,、藥液或藥粉在實際灌裝前能夠放置的最長時間，采用最長允許儲存時間的灌裝設(shè)備,、灌裝部件、儲罐,、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝；采用無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基到實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝,。
培養(yǎng)基模擬灌裝驗證僅僅是無菌工藝系統(tǒng)在某一個時間點的表現(xiàn)，包括環(huán)境,、設(shè)備、程序和人員,，并不能保證不同時間段內(nèi)也可以表現(xiàn)出同樣的微生物保證水平,，因此為保障無菌產(chǎn)品生產(chǎn),，通過控制和驗證所有的相關(guān)工藝，例如環(huán)境監(jiān)測,、人員確認和清潔滅菌驗證等,，才有可能維持無菌工藝的水平,，所以單獨驗證相關(guān)的的清潔和滅菌工藝對保障無菌工藝生產(chǎn)的中產(chǎn)品質(zhì)量也非常重要。