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培養(yǎng)基成分和質(zhì)量是保證藥敏結(jié)果準(zhǔn)確性的先決條件
閱讀:89 發(fā)布時(shí)間:2025-1-14藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基的選擇具有一定的原則和要求,不以個(gè)人經(jīng)驗(yàn)或愛好而更改,。為了使臨床試驗(yàn)和醫(yī)療保健服務(wù)水平具備一致的標(biāo)準(zhǔn),,許多國家或機(jī)構(gòu)制定了不同的參照標(biāo)準(zhǔn),。由于參照標(biāo)準(zhǔn)有所差異,,故藥敏培養(yǎng)基的要求也有所不同。我國藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參照美國CLSI標(biāo)準(zhǔn)文件,,則要求除了特殊菌群,,K-B法所用的培養(yǎng)基必須是M-H培養(yǎng)基;英國參照的標(biāo)準(zhǔn)BSAC則要求培養(yǎng)基為ISO培養(yǎng)基,,而M-H營養(yǎng)瓊脂只適用于葡萄球菌的藥敏試驗(yàn)。因此在工作中,,我們要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膮⒄誄LSI,,根據(jù)不同菌群的需求選擇合適,、正確的藥敏培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基對(duì)藥敏結(jié)果的影響因素具體如下:
1,、pH:pH的變化可導(dǎo)致抑菌圈直徑變大或變小。
2,、培養(yǎng)基中含有能拮抗菌藥活性的物質(zhì):如鈣,、鎂離子能降低氨基糖苷類藥物的抗菌活性,。
3、培養(yǎng)基的厚度:標(biāo)準(zhǔn)厚度為4mm,厚度>4mm,,抑菌圈則會(huì)變小,,<4mm,則會(huì)變小,。
4、培養(yǎng)基的濕度:使用藥物平皿前一般先在室溫平衡半個(gè)小時(shí),,使培養(yǎng)基表面干燥,培養(yǎng)基濕度過高不利于細(xì)菌的生長或?qū)咕幤鸬较♂屪饔谩?/span>
5,、培養(yǎng)基的硬度:硬度過高不利于抗菌藥在瓊脂中的擴(kuò)散,,可導(dǎo)致抑菌圈直徑變小,。
6、營養(yǎng)條件:營養(yǎng)條件太差不利于細(xì)菌的生長,,抑菌圈直徑變大,;反之,,培養(yǎng)及營養(yǎng)條件太好會(huì)讓抑菌圈直徑變小,。
將這些原理和原則解說后,針對(duì)他們對(duì)話中的問題,,我一一進(jìn)行了剖析:
根據(jù)CLSI,絕大多數(shù)細(xì)菌藥敏試驗(yàn)瓊脂均為標(biāo)準(zhǔn)的M-H瓊脂,,M-H瓊脂基本不含有抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性的物質(zhì),,可滿足大多數(shù)細(xì)菌的生長需要,,腸球菌對(duì)營養(yǎng)要求不高且生長速度較快,因此可選用M-H瓊脂(MHA),,而不是血平皿,。對(duì)于大多數(shù)細(xì)菌,MHA是不需要添加羊血,,血液或血清中的蛋白會(huì)不同程度結(jié)合抗菌藥分子,影響了抗菌藥物的活性,,如羊血中的某些成分可抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性,,同時(shí)也可影響新生霉素、萘夫西林及頭孢菌對(duì)腸球菌的藥敏結(jié)果,。
溶血鏈球菌、肺炎鏈球菌等營養(yǎng)要求高的苛養(yǎng)菌則需要使用M-H瓊脂+5%脫纖維羊血培養(yǎng)基,,也叫M-H藥敏試驗(yàn)血瓊脂平板(MHBA)。MHBA與普通的分離細(xì)菌的血平板或者哥倫比亞血平板(CNA)雖然長相相似,,但配方及產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(如pH,、濕度等)均不一樣,是不能相互代替使用的,。為了比較肺炎鏈球菌ATCC49619在MHBA和 CNA培養(yǎng)基上的藥敏結(jié)果,在其他條件均一致的情況下我們分別用MHBA和CNA做了藥敏試驗(yàn),,結(jié)果發(fā)現(xiàn),,CNA的藥敏結(jié)果抑菌圈直徑偏大,細(xì)菌生長情況較差,,從而導(dǎo)致“假敏感"結(jié)果。
因此,,作為一名合格的微生物檢驗(yàn)人員,,我們應(yīng)該時(shí)刻遵守操作規(guī)程,,牢記標(biāo)準(zhǔn)要求,熟讀規(guī)則原理,,杜絕含糊不清,、似是而非,才能確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,。