技術文章
藥敏試驗培養(yǎng)基的選擇對藥敏結果的影響因素
閱讀:52 發(fā)布時間:2025-1-9藥敏試驗培養(yǎng)基的選擇具有一定的原則和要求,,不以個人經驗或愛好而更改。為了使臨床試驗和醫(yī)療保健服務水平具備一致的標準,,許多國家或機構制定了不同的參照標準,。由于參照標準有所差異,故藥敏培養(yǎng)基的要求也有所不同,。我國藥敏試驗結果判斷標準參照美國CLSI標準文件,,則要求除了特殊菌群,K-B法所用的培養(yǎng)基必須是M-H培養(yǎng)基,;英國參照的標準BSAC則要求培養(yǎng)基為ISO培養(yǎng)基,,而M-H營養(yǎng)瓊脂只適用于葡萄球菌的藥敏試驗。因此在工作中,,我們要嚴謹?shù)膮⒄誄LSI,,根據(jù)不同菌群的需求選擇合適、正確的藥敏培養(yǎng)基。
培養(yǎng)基的成分和質量是保證藥敏結果準確性的先決條件,。培養(yǎng)基對藥敏結果的影響因素具體如下:
1,、pH:pH的變化可導致抑菌圈直徑變大或變小。
2,、能拮抗菌藥活性的物質:如鈣,、鎂離子能降低氨基糖苷類藥物的抗菌活性。
3,、厚度:標準厚度為4mm,厚度>4mm,,抑菌圈則會變小,<4mm,則會變小,。
4,、濕度:使用藥物平皿前一般先在室溫平衡半個小時,使培養(yǎng)基表面干燥,,濕度過高不利于細菌的生長或對抗菌藥起到稀釋作用,。
5、硬度:硬度過高不利于抗菌藥在瓊脂中的擴散,,可導致抑菌圈直徑變小,。
6、營養(yǎng)條件:營養(yǎng)條件太差不利于細菌的生長,,抑菌圈直徑變大,;反之,培養(yǎng)及營養(yǎng)條件太好會讓抑菌圈直徑變小,。
將這些原理和原則解說后,,針對他們對話中的問題,我一一進行了剖析:
根據(jù)CLSI,,絕大多數(shù)細菌藥敏試驗瓊脂均為標準的M-H瓊脂,,M-H瓊脂基本不含有抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性的物質,可滿足大多數(shù)細菌的生長需要,,腸球菌對營養(yǎng)要求不高且生長速度較快,因此可選用M-H瓊脂(MHA),,而不是血平皿,。對于大多數(shù)細菌,MHA是不需要添加羊血,,血液或血清中的蛋白會不同程度結合抗菌藥分子,,影響了抗菌藥物的活性,如羊血中的某些成分可抑制磺胺類藥物和四環(huán)素類藥物抗菌活性,,同時也可影響新生霉素,、萘夫西林及頭孢菌對腸球菌的藥敏結果。
溶血鏈球菌,、肺炎鏈球菌等營養(yǎng)要求高的苛養(yǎng)菌則需要使用M-H瓊脂+5%脫纖維羊血培養(yǎng)基,,也叫M-H藥敏試驗血瓊脂平板(MHBA),。MHBA與普通的分離細菌的血平板或者哥倫比亞血平板(CNA)雖然長相相似,但配方及產業(yè)標準(如pH,、濕度等)均不一樣,,是不能相互代替使用的。為了比較肺炎鏈球菌ATCC49619在MHBA和 CNA培養(yǎng)基上的藥敏結果,,在其他條件均一致的情況下我們分別用MHBA和CNA做了藥敏試驗,,結果發(fā)現(xiàn),CNA的藥敏結果抑菌圈直徑偏大,,細菌生長情況較差,,從而導致“假敏感"結果。
因此,,作為一名合格的微生物檢驗人員,,我們應該時刻遵守操作規(guī)程,牢記標準要求,,熟讀規(guī)則原理,,杜絕含糊不清、似是而非,,才能確保結果的準確性,。