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制作牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方圖文過程(二)
閱讀:264 發(fā)布時間:2024-8-16細菌培養(yǎng)的基礎(chǔ)是配制培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方然后再加熱溶解,,補足水分,其制作過程包括以下4個環(huán)節(jié):①清潔玻璃器皿 一般用肥皂液煮沸30 min,或用重鉻酸鉀和濃硫酸配制的溶液浸泡數(shù)10 min,,然后用清水沖洗,,晾干后保存?zhèn)溆?。②配制液體培養(yǎng)基 a.根據(jù)需要配制培養(yǎng)基數(shù)量,先在燒杯中注入少量蒸餾水,;b.按培養(yǎng)基配方稱量各種成分的原料,,依次使之溶解;c.補足需水量,;d.如用牛肉膏,、蛋白胨配制時,需加熱熔化后溶解,;e.加熱后,補足水分即可,。③配制固體培養(yǎng)基 在液體培養(yǎng)基里加入一定量的瓊脂,,加熱熔化即可。④調(diào)pH 先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH,,如果偏酸,,用滴管向培養(yǎng)基滴加1 mol/L 的NaOH溶液,邊加邊攪拌,,并隨時用pH試紙測pH,直到7.4~7.6為止,。反之則用1 mol/L的HCl進行調(diào)節(jié)。⑤過濾分裝 用紗布趁熱過濾,,將濾液分裝于試管中,,其量約為試管體積的1/5(不要玷污管壁)。⑥加棉塞 培養(yǎng)基分裝完畢以后,,在管口上加一個棉塞,。棉塞能防止雜菌污染;保證通氣良好,,加棉塞時,,應使棉塞長度的2/3在試管口內(nèi)。⑦包扎 每10支試管用線繩捆成一捆,,并且在管口外面包上一層牛皮紙,,然后用線繩扎好。在每捆試管外掛上標簽,,注明培養(yǎng)基名稱,、配制日期和制作者姓名。
?。?)滅菌 高壓蒸汽滅菌的效果是細菌培養(yǎng)的關(guān)鍵,。具體操作如下:①打開高壓滅菌鍋,取出里面的滅菌桶,,向鍋內(nèi)加水(最好用開水)水面與底架平齊為宜,。②將扎好的試管管口向上,,豎放在滅菌桶內(nèi),再將滅菌桶放回滅菌鍋,。
注意:滅菌桶內(nèi)的物品不能放得太擠,,否則會影響滅菌效果。
?、奂由w,,并將排氣軟管插入滅菌桶的排氣槽內(nèi)。以兩兩對稱的方式,,同時旋緊相對的兩個緊固螺栓,,以防漏氣。④排出鍋內(nèi)的冷空氣,。⑤當鍋內(nèi)的壓力上升到規(guī)定壓力時,,維持壓力20 min,切斷電源,。⑥壓力降至0以后,,打開排氣閥,排氣完畢打開滅菌鍋,。
?。?)擱置斜面 如果要制作斜面培養(yǎng)基,將滅菌后的培養(yǎng)基冷卻到50℃,,每個試管帶棉塞的一端擱在一根木棒上,,使培養(yǎng)基形成斜面,斜面的長度不超過試管總長度的一半,。
(4) 檢驗滅菌效果滅菌好的培養(yǎng)基在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,,檢驗滅菌效果。
帶圖文章來源于□ɑ,。灆銫+蒶葒銫的作品:
4.置于另一個小燒杯中.....
(所示為牛肉膏)
5. 用熱水溶解牛肉膏....
6.將溶解后的牛肉膏倒入大燒杯中.....
7.調(diào)節(jié)混合溶液的pH至7.4.....
8.稱取15-20克瓊脂..
9.把瓊脂加入到混合溶液中.....
10.加熱,直至瓊脂全部融化.....
11.分裝于試管,三角瓶中,加塞,包扎.冷卻后即為固體培養(yǎng)基...