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(1)定義薄層色譜，或稱薄層層析,，薄層層析是把支持物均勻涂布于支持板(常用玻璃板,，也可用滌綸布等)上形成薄層，然后用相應(yīng)的溶劑進(jìn)行展開(kāi),。從而對(duì)混合樣品進(jìn)行分離,、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)。

　　(2)分類薄層層析可根據(jù)作為固定相的的支持物不同,，分為薄層吸附層析(吸附劑),、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑),、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等,。一般實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

　　(3)方法的優(yōu)缺點(diǎn)

　　①優(yōu)點(diǎn)：操作方便,、設(shè)備簡(jiǎn)單,、顯色容易等特點(diǎn)，同時(shí)展開(kāi)速率快,，一般僅需15～20min,；混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10～100倍，它既適用于只有

　　0.01μg的樣品分離,，又能分離大于500mg的樣品作制備用,，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑,。

　　②缺點(diǎn)：對(duì)生物高分子的分離效果不甚理想,。

　　(3)操作步驟

　　①薄層板制備：除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,，去除表面的氣泡后,，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為

　　0.2～O.3mm),，取下涂好薄層的玻板,，置水平臺(tái)上于室溫下晾干，后在110℃烘30min,，即置有干燥劑的干燥箱中備用,。使用前檢查其均勻度(可通過(guò)透射光和反射光檢視)。

　　②點(diǎn)樣：除另有規(guī)定外,，用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上,，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.Ocm,，樣點(diǎn)直徑及點(diǎn)間距離同紙色譜法,，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面,。

　　③展開(kāi)：展開(kāi)室如需預(yù)先用展開(kāi)劑飽和,，可在室中加入足夠量的展開(kāi)劑，并在壁上貼二條與室一樣高,、寬的濾紙條,，一端浸入展開(kāi)劑中，密封室頂?shù)纳w,，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作,。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)室的展開(kāi)劑中，浸入展開(kāi)劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.Ocm(切勿將樣點(diǎn)浸入展開(kāi)劑中),，密封室蓋,，待展開(kāi)至規(guī)定距離(一般為10-15cm)，取出薄層板,，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè),。

　　④顯色：取出的薄層板,，立即噴灑顯色劑，使其顯色，計(jì)算Rf值或使之出現(xiàn)各種有色的斑點(diǎn),，與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)照比較,，可確定其成分。