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在HPLC中高效液相色譜儀原理是什么?
閱讀:1727 發(fā)布時(shí)間:2021-11-5 高效液相色譜儀是一種常用的色譜儀產(chǎn)品,,主要由儲(chǔ)液器、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成,,被廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域中,。那么高效液相色譜儀原理是什么?是依靠什么原理工作的,?
高效液相色譜儀原理
分配系數(shù)與組分,、流動(dòng)相和固定相的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān),也與溫度,、壓力有關(guān),。在不同的色譜分離機(jī)制中,K有不同的概念:吸附色譜法為吸附系數(shù),,離子交換色譜法為選擇性系數(shù) (或稱交換系數(shù)),,凝膠色譜法為滲透參數(shù)。但一般情況可用分配系數(shù)來表示,。
在條件(流動(dòng)相,、固定相,、溫度和壓力等)一定,樣品濃度很低時(shí)(Cs,、Cm很小)時(shí),,K只取決于組分的性質(zhì),而與濃度無關(guān),。這只是理想狀態(tài)下的色譜條件,,在這種條件下,得到的色譜峰為正常峰;在許多情況下,,隨著濃度的增大,,K減小,這時(shí)色譜峰為拖尾峰;而有時(shí)隨著溶質(zhì)濃度增大,,K也增大,,這時(shí)色譜峰為前延峰。因此,,只有盡可能減少進(jìn)樣量,,使組分在柱內(nèi)濃度降低,K恒定時(shí),,才能獲得正常峰,。
在同一色譜條件下,樣品中K值大的組分在固定相中滯留時(shí)間長(zhǎng),,后流出色譜柱,;K值小的組分則滯留時(shí)間短,先流出色譜柱,?;旌衔镏懈鹘M分的分配系數(shù)相差越大,越容易分離,,因此混合物中各組分的分配系數(shù)不同是色譜分離的前提,。
在HPLC中,固定相確定后,,K主要受流動(dòng)相的性質(zhì)影響,。實(shí)踐中主要靠調(diào)整流動(dòng)相的組成配比及pH值,以獲得組分間的分配系數(shù)差異及適宜的保留時(shí)間,,達(dá)到分離的目的