日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細(xì)胞特性

1） 來源：肺
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T75瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式

（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇,；

（2）存活細(xì)胞,，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，再進(jìn)行凍存,。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

（3）收到細(xì)胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系,。

CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細(xì)胞用途：僅供科研使用。

接收后的處理：
1） 收到細(xì)胞后,，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2） 在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行,，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,。看細(xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下,，同時給剛收到的細(xì)胞拍照,，（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3） 觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,。
4） 貼壁細(xì)胞：在運輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長,，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）,。
5） 懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基）,。
6）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后di一次傳代建議1：2傳代 ,。

                     
CCC-HPF-1 人胚肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化,。
3. 輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。

下面T25瓶為類；

1,，細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1mlyi酶,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度1-2xE6/ml,，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識。
3,，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

鏡像綺點（上海）細(xì)胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)：

一、原代細(xì)胞服務(wù)
      各類模式哺乳動物的多種原代細(xì)胞資源,；
      多種人源性正常及腫瘤原代細(xì)胞資源,；
      原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等,；
      原代細(xì)胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù)；

二,、細(xì)胞株/系服務(wù)
      細(xì)胞株/系培養(yǎng)、增殖,、凍存和相關(guān)說明書,；
      細(xì)胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo)；
      細(xì)胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關(guān)生長因子、試劑等,；

三,、iPS細(xì)胞
      iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）；
      iPS細(xì)胞增殖及冷凍保存,；
      iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí),；
      新藥及實驗儀器上市前評估；

四,、技術(shù)外包服務(wù)：各類細(xì)胞生物學(xué)實驗,、分子生物學(xué)實驗、顯微鏡拍照服務(wù)等

五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等