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PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞特性
1） 來源：豬鼻
2） 形態(tài)：成纖維細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,；
（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系,。
細胞用途：僅供科研使用。
PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞接受后的處理：
1） 收到細胞后,，請檢查是否漏液,，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代,。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們取得聯(lián)系。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清,，10%,；雙抗,，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
注：*次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類,；
1,，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液,，注意凍存管做好標識,。
3，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和服務介紹：
一,、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二,、細胞系服務：
細胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等
三,、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術外包服務、客戶定制服務等
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