首頁 >> 供求商機
該細胞是大鼠胰島細胞RIN-m的克隆,，分泌胰島素及L型多巴脫羧酶,，不產生生長激素抑制激素。
細胞特性
1） 來源：大鼠,，胰島
2） 形態(tài)：上皮細胞樣,，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸,，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長,，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現污染,，請及時拍照與我們聯系,。
RIN-M5F 大鼠β胰島素瘤細胞用途：僅供科研使用。
細胞接受后的處理：
1） 收到細胞后,，請檢查是否漏液,，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們,。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代,。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現污染或疑似污染,，請及時與我們取得聯系。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清,，10%；雙抗,，1%,。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現用現配,。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
注：*次傳代推薦傳代比例為1:2,，以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。
3） 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存,。
下面T25瓶為例,；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數板計數,。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和服務介紹：
一,、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二,、細胞系服務：
細胞株/系培養(yǎng),、增殖、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等
三,、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術外包服務、客戶定制服務等
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司
7