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貨物所在地:上海上海市
所在地: 上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路4
更新時間:2024-12-20 16:09:51
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G422 小鼠神經(jīng)膠質瘤細胞/鏡像綺點(iCell)介紹
1964年建株,;甲基膽蒽植入Km小鼠腦內誘發(fā)星形細胞瘤,,傳至第120代后轉為膠質細胞瘤,;瘤細胞懸液同系小鼠皮下、肌肉,、腦內移植,成功率皆*,。肌肉及腦內移植可形成較規(guī)律的移植性瘤株,,存活時間腦內型15.9±4.8天;肌肉型20.3±6.6天,。
細胞特性
1)來源:星形細胞瘤
2)形態(tài):上皮細胞樣,,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,,請檢查是否漏液,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們,。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基,。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們取得聯(lián)系。
細胞用途:僅供科研使用,。
G422 小鼠神經(jīng)膠質瘤細胞/鏡像綺點(iCell)培養(yǎng)操作規(guī)程,,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,,貨號11995-065),,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,,移入15ml離心管中,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數(shù),。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,,后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數(shù)后離心,,用血清重懸浮,,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務:
細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關生長因子、試劑等
三,、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術外包服務、客戶定制服務等
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