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CT26 小鼠結腸癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）介紹
CT26細胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導得到的未分化的小鼠結腸癌細胞,，該細胞的一個克隆形成的細胞系被命名為CT26.WT,。CT26.WT被逆轉錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因,、編碼腫瘤相關抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶,。CT26.WT和CT26.CL25細胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25細胞可以表達腫瘤相關抗原和beta半乳糖苷酶,，因此這兩株細胞可以聯合用于免疫治療和宿主免疫反應的研究,。
細胞特性
1） 來源：小鼠結腸
2） 形態(tài)：成纖維細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,；
（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。
（3）收到細胞后請拍照,，3天內如果發(fā)現污染，請及時拍照與我們聯系,。
CT26 小鼠結腸癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）接受后的處理：
1） 收到細胞后,，請檢查是否漏液，如果漏液,，請拍照片發(fā)給我們,。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代,。
5） 接到細胞次日,，請檢查細胞是否污染,，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系,。
細胞用途：僅供科研使用,。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清,，10%；雙抗,，1%,。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現用現配,。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3. 輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為類,；
1,，細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,，細胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數板計數,。
2，4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細胞,，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻,，DMSO終濃度為10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液,，注意凍存管做好標識,。
3，將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和服務介紹：
一、原代細胞服務：
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務：
細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子,、試劑等
三,、iPS細胞服務：
iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四、其他技術外包服務,、客戶定制服務等
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