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貨物所在地:上海上海市
所在地: 上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路4
更新時間:2024-12-20 16:09:31
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SH-SY5Y 人神經(jīng)母細胞瘤細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹
SH-SY5Y是1970年建自骨瘤轉移灶的神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH細胞系經(jīng)三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性,。SH-SY5Y細胞的飽和密度大于1X106細胞/cm2,。
細胞特性
1) 來源:腦神經(jīng)母細胞瘤,,轉移部位骨髓
2) 形態(tài):上皮細胞樣,,半貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體,、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,;
(2)存活細胞,收到后應繼續(xù)生長,,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,,再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。
(3)收到細胞后請拍照,,3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,請及時拍照與我們聯(lián)系,。
SH-SY5Y 人神經(jīng)母細胞瘤細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用,。
細胞接收后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) T25瓶中的培養(yǎng)基取出離心后,去上清,,添加6ml新的*培養(yǎng)基,,重新加入原T25培養(yǎng)瓶。
4) 如果細胞長滿90%請及時進行細胞傳代,,傳代培養(yǎng)用本公司附帶的*培養(yǎng)基,。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們取得聯(lián)系。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM/F-12(1:1)培養(yǎng)基,;優(yōu)質胎牛血清,,10%;雙抗,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至6ml,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 將上清取出,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化,。
3. 輕輕打勻后吸出,,和上清一起在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注:*次傳代推薦傳代比例為1:2,,以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定,。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為類,;
1,細胞凍存時,,取出上清,,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入1ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清,。加1ml血清重懸細胞,,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,,DMSO終濃度為10%,,細胞密度1-2xE6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,,注意凍存管做好標識。
3,,將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(上海)細胞技術有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹:
一、原代細胞服務:
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑,、kit,、培養(yǎng)基添加劑等
原代細胞相關技術服務及整體實驗外包服務
二、細胞系服務:
細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關說明書
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導
細胞系培養(yǎng)基、添加劑,、血清及相關生長因子,、試劑等
三、iPS細胞服務:
iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層)
iPS細胞增殖及冷凍保存
iPS基礎培養(yǎng)技術實習
新藥及實驗儀器上市前評估
四,、其他技術外包服務,、客戶定制服務等
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