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貨物所在地:上海上海市
所在地: 上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路4
更新時間:2024-12-20 16:09:03
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C918 人眼脈絡(luò)黑色瘤細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹
1) 來源:眼睛
2) 形態(tài):多角,,貼壁生長
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性
5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式:
(1)干冰運輸,,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復(fù)蘇;
(2)存活細胞,,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。
(3)收到細胞后請拍照,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,,請及時拍照與我們聯(lián)系,。
C918 人眼脈絡(luò)黑色瘤細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用。
細胞接受后的處理:
1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基,。
4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,。
5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,;hepes,,20mM;雙抗,,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并檢查細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。
下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù):
一、原代細胞服務(wù)
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源,;
原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑,、kit、培養(yǎng)基添加劑等,;
原代細胞相關(guān)技術(shù)服務(wù)和整體實驗外包服務(wù),;
二、細胞株/系服務(wù)
細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關(guān)說明書;
細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導(dǎo),;
細胞系培養(yǎng)基,、添加劑、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等,;
三、iPS細胞
iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在),;
iPS細胞增殖及冷凍保存,;
iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習(xí);
新藥及實驗儀器上市前評估,;
四、技術(shù)外包服務(wù):各類細胞生物學(xué)實驗,、分子生物學(xué)實驗,、顯微鏡拍照服務(wù)等
五、其他:根據(jù)客戶需要定制服務(wù)等