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A-704-A-704 人腎癌細胞/STR鑒定
  • A-704-A-704 人腎癌細胞/STR鑒定

貨物所在地:上海上海市

地: 上海市徐匯區(qū)聚科生物園銀都路4

更新時間:2024-12-20 16:08:59

瀏覽次數(shù):87

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( 聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,,謝謝?。?/p>

A-704 人腎癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)
A-704 人腎癌細胞介紹
A-704細胞系來源于78歲男性腎癌患者,D.J. Giard建系,,該細胞適宜做轉(zhuǎn)染宿主,。細胞在免疫缺陷小鼠上不能形成移植瘤,但是可以在半固體培養(yǎng)基中形成克隆,。
細胞特性
1) 來源:腎癌
2) 形態(tài):上皮細胞樣,,貼壁生長
3) 污染:支原體、細菌,、酵母和真菌檢

A-704 人腎癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)介紹

A-704細胞系來源于78歲男性腎癌患者,,D.J. Giard建系,該細胞適宜做轉(zhuǎn)染宿主,。細胞在免疫缺陷小鼠上不能形成移植瘤,,但是可以在半固體培養(yǎng)基中形成克隆。


細胞特性

1) 來源:腎癌

2) 形態(tài):上皮細胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106 個/mL

4) 污染:支原體,、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝


運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式:

(1)干冰運輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,;

(2)存活細胞,,收到后應繼續(xù)生長,傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,,再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

(3)收到細胞后請拍照,,3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染,,請及時拍照與我們聯(lián)系。


A-704 人腎癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點(iCell)用途:僅供科研使用,。

細胞接受后的處理:

1) 收到細胞后,,請檢查是否漏液,如果漏液,,請拍照片發(fā)給我們,。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,。

5) 接到細胞次日,,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。


細胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備McCOY's 5A培養(yǎng)基;北美胎牛血清,,10%,;雙抗,1%,。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?50px皿中,,加入約8ml培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度,。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。

細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。

下面T25瓶為例;

1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1mlyi酶,細胞變圓脫落后,,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。

3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

鏡像綺點(上海)細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和技術(shù)服務:

一,、原代細胞服務
      各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源;
      多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源,;
      原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑,、kit、培養(yǎng)基添加劑等,;
      原代細胞相關(guān)技術(shù)服務和整體實驗外包服務,;

二、細胞株/系服務
      細胞株/系培養(yǎng),、增殖,、凍存和相關(guān)說明書;
      細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導,;
      細胞系培養(yǎng)基,、添加劑、血清及相關(guān)生長因子,、試劑等,;

三、iPS細胞
      iPS細胞基礎培養(yǎng)(有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在),;
      iPS細胞增殖及冷凍保存,;
      iPS基礎培養(yǎng)技術(shù)實習;
      新藥及實驗儀器上市前評估,;

四,、技術(shù)外包服務:各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗,、顯微鏡拍照服務等

五,、其他:根據(jù)客戶需要定制服務等


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