培養(yǎng)小鼠小膠質BV2細胞需要遵循一系列特定的步驟和注意事項,，以確保細胞的健康生長和實驗的準確性。以下是培養(yǎng)BV2細胞的一般步驟：
一,、準備階段
1、培養(yǎng)基準備：使用DMEM高糖培養(yǎng)基,，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素（P/S）,。
2、環(huán)境控制：確保培養(yǎng)箱內(nèi)的空氣占95%,，二氧化碳濃度為5%,，溫度保持在37℃。
二,、復蘇階段
1,、提前將水浴鍋預熱至37℃，培養(yǎng)基復溫至室溫或37℃，離心機設置好轉速,。
2,、從液氮罐中取出細胞，迅速搖晃直至融化至米粒大小冰塊時終止水浴,，整個過程不超過2分鐘,。
3、直接將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心2分鐘,，棄上清,，用預熱的培養(yǎng)基緩慢加入凍存管，輕柔重懸細胞后接種至培養(yǎng)瓶中,。
三,、傳代階段
1、輕輕吸走培養(yǎng)上清,，留2-3mL培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面吹下細胞,。
2、將細胞懸液轉移至離心管,，900rpm離心3-5分鐘,，棄上清。
3,、加新的全培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里，補足全培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。
四、凍存階段
1,、配制程序性凍存液,，推薦配方為92%FBS+8%DMSO或92%全培養(yǎng)基+8%DMSO。
2,、先將細胞按傳代步驟獲得細胞沉淀,，加入適量程序性凍存液輕輕重懸細胞，并將細胞懸液轉移至凍存管中,。
3,、將凍存管放入程序性凍存盒，放入-80℃冰箱過夜,，然后轉移至液氮保存并登記細胞保存位置,。
總之，培養(yǎng)小鼠小膠質BV2細胞需要嚴格控制培養(yǎng)條件,、及時處理細胞狀態(tài)變化,，并遵循規(guī)范的操作流程,。通過這些措施，可以確保BV2細胞的健康生長和實驗的順利進行,。
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