培養(yǎng)小鼠小膠質(zhì)BV2細(xì)胞需要遵循一系列特定的步驟和注意事項(xiàng)，以確保細(xì)胞的健康生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,。以下是培養(yǎng)BV2細(xì)胞的一般步驟：
一,、準(zhǔn)備階段
1、培養(yǎng)基準(zhǔn)備：使用DMEM高糖培養(yǎng)基,，添加10%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-鏈霉素（P/S）,。
2、環(huán)境控制：確保培養(yǎng)箱內(nèi)的空氣占95%,，二氧化碳濃度為5%,，溫度保持在37℃。
二,、復(fù)蘇階段
1,、提前將水浴鍋預(yù)熱至37℃，培養(yǎng)基復(fù)溫至室溫或37℃,，離心機(jī)設(shè)置好轉(zhuǎn)速,。
2、從液氮罐中取出細(xì)胞,，迅速搖晃直至融化至米粒大小冰塊時(shí)終止水浴,，整個(gè)過(guò)程不超過(guò)2分鐘。
3,、直接將凍存管以離心力150g(約900rpm)左右離心2分鐘,，棄上清，用預(yù)熱的培養(yǎng)基緩慢加入凍存管,，輕柔重懸細(xì)胞后接種至培養(yǎng)瓶中,。
三、傳代階段
1,、輕輕吸走培養(yǎng)上清,，留2-3mL培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞。
2,、將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管,，900rpm離心3-5分鐘，棄上清,。
3,、加新的全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里，補(bǔ)足全培養(yǎng)基,，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。
四、凍存階段
1,、配制程序性凍存液,，推薦配方為92%FBS+8%DMSO或92%全培養(yǎng)基+8%DMSO。
2,、先將細(xì)胞按傳代步驟獲得細(xì)胞沉淀,，加入適量程序性凍存液輕輕重懸細(xì)胞，并將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至凍存管中,。
3,、將凍存管放入程序性凍存盒，放入-80℃冰箱過(guò)夜,，然后轉(zhuǎn)移至液氮保存并登記細(xì)胞保存位置,。
總之，培養(yǎng)小鼠小膠質(zhì)BV2細(xì)胞需要嚴(yán)格控制培養(yǎng)條件,、及時(shí)處理細(xì)胞狀態(tài)變化,，并遵循規(guī)范的操作流程。通過(guò)這些措施,，可以確保BV2細(xì)胞的健康生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,。
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