人臍靜脈細胞HUVEC采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。人臍靜脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
人人臍靜脈細胞HUVEC分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一,,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈,。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒,。

對于貼壁人臍靜脈細胞HUVEC,傳代可參考以下方法:
1,、棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2,、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。
3、按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4、收到細胞后傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,,建議凍存一支備用,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
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