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酶標(biāo)儀的檢測原理
光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光,， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光,。人們只所以能夠看到色彩,，是因?yàn)楣庹丈涞轿矬w上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,，是因?yàn)橹参镂樟斯庵械募t色光譜,。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值,。
檢測單位：
光通過被檢測物,，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下,，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系,。
檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫,，表示被檢測物吸收掉的光密度,， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,， Ι0 為在檢測物之前的光強(qiáng)度，Ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度,。
OD值由下述公式計(jì)算：
E＝OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量,。如果選擇其它的波長段,，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,，在測定檢測物時,，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測，稱為測量波
長,。
但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長,，以消除這個不準(zhǔn)確性,。在參照波長下，檢測物光的吸收zui小,。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收,。
Anthos 酶標(biāo)儀檢測值計(jì)算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號,，zui大為4095,。儀器定義沒有光源下的透光值為 0％，沒有檢測物的透光值為100％,。則實(shí)際檢測中,，檢測物的透光值均在 0％一100％之間。透光值
的計(jì)算如下：
T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
其中T為透光值,， Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值,， Min為在 0％的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Max為在100％的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值,，舉例如下：
MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
T=（30-20）/3600-20）＝0．0028
OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位
儀器會自動對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位,，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時,，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個點(diǎn)的測量,，選取zui中間的5個點(diǎn)的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響,。
酶標(biāo)儀的用途和其它提示
用于ELISA試劑的測定,，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室,，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。
質(zhì)量控制
質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素,。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制,。
空白校正
有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的,，請按照試劑盒的 說明書要求進(jìn)行,。
檢測結(jié)果的解釋
由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板,，檢測試劑的體積,，都會造成OD值的不同，因此,， 只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析,。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進(jìn)行。