氣態(tài)液氮罐廣泛用于細(xì)胞凍配上,,如牛精液冷凍的冷源廣泛應(yīng)用液氮,。顆粒精液在經(jīng)液氮冷卻的氟板(聚四氟乙烯)、銅紗網(wǎng),、鋁板上滴凍,。要使承接精液的表面與液氮面連結(jié)一定的間隔(1-2厘米)。在滴凍的歷程中,,要維持在-80~-120℃的溫度,。滴凍前將顛末均衡的精液充實(shí)混勻,并查抄精子的活率,。滴要敏捷,,顆粒要?jiǎng)蚍Q(chēng),每毫升顛末稀釋的精液滴10粒左右為宜,。滴凍竣事后,,要停頓2-3分鐘,待全部顆粒已凍結(jié)立刻投入液氮,。經(jīng)抽樣查抄(一樣通常隨機(jī)抽取2粒),,解凍活率在0.3以上者,即可裝于紗布袋中,,經(jīng)標(biāo)志后在液氮中生存,。每滴凍完一頭公牛的精液后,必須調(diào)換氟板等用具,。
現(xiàn)在細(xì)管的容量分0.25毫升和0.5毫升兩種,,氣態(tài)液氮罐由無(wú)毒塑料(聚氯乙烯)制成。管的一端填有棉塞和聚乙烯粉末,,粉末遇水即固化主動(dòng)封口,,輸精時(shí)又成為推送精液的活塞,;另一端在注入精液后,,可以聚乙烯粉或鋼珠(或塑料珠)封口,要細(xì)致在封口處與精液間留有10-13毫米的空間,,防備冷凍歷程中因膨脹引起細(xì)管爆裂,。
長(zhǎng)期以來(lái),科學(xué)家們都認(rèn)為氣態(tài)液氮罐儲(chǔ)存的干細(xì)胞(NSCs)是一種具有無(wú)限自我更新能力的均質(zhì)細(xì)胞,。在進(jìn)入成體NSC研究領(lǐng)域的時(shí)候,,一些研究證明NSCs實(shí)際上是異質(zhì)的,,不均勻的,它們的自我更新能力,,休眠期和命運(yùn)均不同,,這說(shuō)明NSC亞群在整體NSC干細(xì)胞貢獻(xiàn)不同,必須協(xié)調(diào)相互的作用,。而亞群之間的不平衡也許就會(huì)損傷NSC,,導(dǎo)致NSC功能衰退。
對(duì)氣態(tài)液氮罐儲(chǔ)存干細(xì)胞周?chē)h(huán)境分子機(jī)制作分析,,實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)休眠期成體NSCs受控于外在微環(huán)境信號(hào)來(lái)引導(dǎo)它們的行為,,而激活的NSCs和祖細(xì)胞則是依賴(lài)于內(nèi)在轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程。通過(guò)了解不同微環(huán)境因素對(duì)特定NSCs亞群的調(diào)控深入解析NSCs,。