顯微圖像分析儀的校準是一個復雜而細致的過程,,涉及多個方面,。通過嚴格的校準流程和精確的操作,,可以確保顯微圖像分析儀的準確性和可靠性,從而為科研和臨床應用提供高質(zhì)量的圖像分析結果,。
顯微圖像分析儀的校準方式主要包括以下幾個關鍵步驟:
1. 環(huán)境條件準備:確保校準環(huán)境的溫度,、濕度和光照條件穩(wěn)定且適宜,通常要求環(huán)境溫度為22℃±4℃,,相對濕度≤70%,,供電電源為(220±22)V,電源頻率(50±1)Hz,,且儀器應安放在穩(wěn)壓的工作臺上,,工作室內(nèi)潔凈,,無揮發(fā)性有機溶劑及腐蝕性氣體,無強磁場,、靜電等干擾,。
2. 外觀檢查:查看顯微圖像分析儀的光源是否正常,有無影響正常工作的機械損傷,,各調(diào)節(jié)器或按鈕是否工作正常,,分析儀自帶的蓋玻片、校正板是否干凈整潔,。
3. 光學系統(tǒng)校準
- 清晰度與分辨率調(diào)整:使用標準測試樣本,,如分辨率測試卡或標準顯微圖像,來評估設備的光學系統(tǒng)性能,。通過調(diào)整鏡頭的焦距,、光圈等參數(shù),以及優(yōu)化光路系統(tǒng)的配置,,確保設備在捕捉圖像時具有足夠的清晰度和分辨率,。
- 場曲校準:安裝物鏡,將0.01mm標準測微尺放置在工作臺上并壓緊,,旋轉調(diào)焦旋鈕,,先使視場中心清晰成像,再調(diào)整至邊緣清晰,,觀察千分表,,記錄偏移量作為場曲誤差,不同倍數(shù)物鏡有相應的場曲誤差指標,,如10X<0.2mm,、100X<0.04mm等。
- 放大倍數(shù)校準:裝上標準目鏡和被檢物鏡,,放置標準測微尺,,觀察測微尺與目鏡中的分劃板是否相符,計算偏移量作為放大倍數(shù)誤差,,一般要求誤差不大于5%,。
4. 計算機圖像處理系統(tǒng)校準:使用一系列已知參數(shù)的標準圖像,包括不同尺寸,、形狀和顏色的物體圖像,,對設備進行測試。通過調(diào)整圖像采集,、處理,、分析和輸出等環(huán)節(jié)的算法和參數(shù),優(yōu)化設備的測量性能,減少誤差和偏差,,以提高測量精度和穩(wěn)定性,。
5. 灰度特性校準
- 灰度重復性校準:待儀器光源穩(wěn)定后,采集灰度等級為K的輸出空白圖像,,每隔2min采集1次,,連續(xù)采集5次后,按公式計算儀器的灰度重復性ΔG,,其值應不大于0.5%,。
- 灰度均勻性校準:同樣在儀器光源穩(wěn)定后,,采集灰度等級K的空白圖像,,選取M×N個采樣區(qū)域的測量值gi,按公式計算儀器的灰度均勻性U,,要求不大于0.5%,。
6. 穩(wěn)定性與重復性測試:在不同時間段和不同條件下,對同一樣本進行多次測量,,記錄測量結果并進行統(tǒng)計分析和比較,,以評估設備的穩(wěn)定性和重復性。同時,,在校準過程中需保持設備穩(wěn)定,,避免振動或溫度變化等因素對校準結果的影響。
7. 校準記錄與驗證:詳細記錄校準過程中的各項參數(shù)和結果,,建立校準檔案,。使用已知參數(shù)的標準樣品進行驗證測試,確保顯微鏡的測量和分析結果準確可靠,。