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菌落計(jì)數(shù)在使用時(shí)應(yīng)該防止出現(xiàn)哪些問題
菌落是指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長物，它是由數(shù)以萬計(jì)相同的細(xì)菌集合而成,。當(dāng)樣品被稀釋到一定程度,，與培養(yǎng)基混合，在一定培養(yǎng)條件下,，每個(gè)能夠生長繁殖的細(xì)菌細(xì)胞都可以在平板上形成一個(gè)可見的菌落,。
菌落總數(shù)就是指在一定條件下(如需氧情況、營養(yǎng)條件,、pH,、培養(yǎng)溫度和時(shí)間等)每克(每毫升)檢樣所生長出來的細(xì)菌菌落總數(shù)。按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定,，即在需氧情況下,，37℃培養(yǎng)48h，能在普通營養(yǎng)瓊脂平板上生長的細(xì)菌菌落總數(shù),，所以厭氧或微需氧菌、有特殊營養(yǎng)要求的以及非嗜中溫的細(xì)菌,，由于現(xiàn)有條件不能滿足其生理需求,，故難以繁殖生長。因此菌落總數(shù)并不表示實(shí)際中的所有細(xì)菌總數(shù),，菌落總數(shù)并不能區(qū)分其中細(xì)菌的種類,，所以有時(shí)被稱為雜菌數(shù)，需氧菌數(shù)等,。
菌落計(jì)數(shù)的注意事項(xiàng)
1,、到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時(shí)間，應(yīng)立即計(jì)數(shù),。如果不能立即計(jì)數(shù),，應(yīng)將平板放置于0-4℃，但不得超過24h,。
2,、計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)選取菌落數(shù)在30-300 CFU之間的平板，若有二個(gè)稀釋度均在30-300 CFU之間時(shí),，按國家標(biāo)準(zhǔn)方法要求應(yīng)以二者比值決定,，比值小于或等于2取平均數(shù)，比值大于2則其較小數(shù)字(有的規(guī)定不考慮其比值大小,，均以平均數(shù)報(bào)告),。
3、若所有稀釋度均不在計(jì)數(shù)區(qū)間。如均大于300 CFU,，則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。如均小于30 CFU，則以至低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。如菌落數(shù)有的大于300 CFU,，有的又小于30 CFU，但均不在30-300 CFU之間,，則應(yīng)以接近300 CFU或30 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。如所有稀釋度均無菌落生長，則應(yīng)按小于1乘以至低稀釋倍數(shù)報(bào)告之,。有的規(guī)定對(duì)上述幾種情況計(jì)算出的菌落數(shù)按估算值報(bào)告,。
4、不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的二個(gè)平板的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),，即稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少,，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,，則應(yīng)視為檢驗(yàn)中的差錯(cuò)(有的食品有時(shí)可能出現(xiàn)逆反現(xiàn)象,，如酸性飲料等)，不應(yīng)作為檢樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù),。
5,、當(dāng)平板上有鏈狀菌落生長時(shí)，如呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,，則應(yīng)作為一個(gè)菌落計(jì),，如存在有幾條不同來源的鏈，則每條鏈均應(yīng)按一個(gè)菌落計(jì)算,，不要把鏈上生長的每一個(gè)菌落分開計(jì)數(shù)。如有片狀菌落生長，該平板一般不宜采用,，如片狀菌落不到平板一半,，而另一半又分布均勻,，則可以半個(gè)平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。
6,、當(dāng)計(jì)數(shù)平板內(nèi)的菌落數(shù)過多(即所有稀釋度均大于300 CFU時(shí)),，但分布很均勻,，可取平板的一半或1/4計(jì)數(shù)。再乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)作為該平板的菌落數(shù),。
7,、菌落數(shù)的報(bào)告，按國家標(biāo)準(zhǔn)方法規(guī)定菌落數(shù)在1-100時(shí),，按實(shí)有數(shù)字報(bào)告，如大于100時(shí),，則報(bào)告前面兩位有效數(shù)字，第三位數(shù)按四舍五入計(jì)算,。固體檢樣以克(g)為單位報(bào)告,，液體檢樣以毫升(ml)為單位報(bào)告,，表面涂擦則以平方厘米(cm2)報(bào)告,。