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垂直電泳槽染色與脫色注意
垂直電泳槽是一種與圓盤電泳槽在原理與結構上略有相似,卻在制膠和電泳方面存在某些差異的電泳槽種類中的一種,。它一般被應用于分子生物學等領域,。由于垂直電泳槽在使用過程中的要求較高,所以在使用時應當注意以下幾點:
分離膠濃度的選擇,。低濃度膠對大分子量蛋白質分離效果好:高濃度膠對小分子量蛋白質分離效果好,;
清洗玻璃板。玻璃板應清洗干凈,,玻璃表面的油污會造成分離膠與濃縮膠界面的不平整,。經用去污劑洗滌后的玻璃板先用蒸餾水沖洗,再用紗布蘸乙醇擦拭玻璃表面,;
TEMED的加入量,。TEMED是促進丙烯酰胺聚合的加速劑。加*果隨試劑保存時間而變化,。對于陳舊試劑,,可適當多加,。事實上,配制分離膠時每塊膠板按2滴加入,,效果也不錯,;
丙烯酰胺的毒性。丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺都是神經性毒劑,,對皮膚有刺激作用,。但在形成凝膠后則無毒。操作時應戴橡膠或塑料手套,,盡量避免接觸皮膚,,并注意實驗后洗手;
電極緩沖液的配制,。電極緩沖液的用量大,、占體積、配制麻煩,。如果經常跑膠,,可考慮配制5X濃度的濃縮液。方法如下:將144g甘氨酸和30﹒2gTris溶于1升蒸餾水中,。使用時稀釋5倍,。