發(fā)酵罐使用的時候怎么確定菌體生長狀況

發(fā)酵罐為研究小型發(fā)酵罐分批培養(yǎng)過程中大腸桿菌的菌體生長狀況,，本實驗以分批培養(yǎng)法培養(yǎng)大腸桿菌,，通過控制發(fā)酵過程的溫度、溶氧,、攪拌速度,、空氣流量、泡沫水平等參數,，并每小時取樣測DO值和還原糖量,，制作菌體生長曲線，以此判斷大腸桿菌的生長發(fā)酵狀況,。本實驗選用生長迅速的大腸桿菌進行發(fā)酵罐的培養(yǎng),，同時定時地取樣測定，包括對菌體進行鏡檢,、測定不同時期發(fā)酵液的細菌濁度以及殘留還原糖的變化發(fā)酵過程中,，微生物的生長呈一定規(guī)律，掌握微生物生長曲線,，可以防止菌種老化衰退,、防止有害產物積累、提高發(fā)酵的效率,，對生產有指導意義,。通過測定生化指標，可大體了解菌體生長曲線,，并在此基礎上采取適當措施促進微生物生長,。生長曲線中，微生物產生代謝產物或抗生素多在對數期末期或穩(wěn)定期，因此可采取方法延長次期,，如通過發(fā)酵罐等方法,，不斷調節(jié)培養(yǎng)基的pH值，去除有害物質,，增加適量的氣體和營養(yǎng)物質,，使微生物延遲進入或不進入衰退期，從而生產出大量的有用的代謝產物,。發(fā)酵罐是生化,、食品、醫(yī)藥,、農藥,、化工等生產領域的常用設備，雖然發(fā)酵罐的類型很多,如自吸式,、氣升式等。但發(fā)酵工廠用得多的還是傳統的通用發(fā)酵罐(機械攪拌發(fā)酵罐)[2],。發(fā)酵罐配備控制系統,，它主要是對發(fā)酵過程中的各種參數如溫度、pH,、溶解氧,、攪拌速度、空氣流量,、補料,、泡沫水平等進行設定、顯示,、記錄以及對這些參數進行反饋調節(jié)控制配制培養(yǎng)基 1) 配制種子固體培養(yǎng)基100mL,，分裝試管，0.1MPa滅菌20min,，然后擺成斜面,。 2) 配制種子培養(yǎng)液600mL，分裝50mL于一個250mL三角瓶中（作一級種子瓶）,，余下550mL平均分裝于三個500mL三角瓶中（作二級種子用）,，同上滅菌。 1.2.2接種與培養(yǎng) 

1) 上罐前兩天,，從冰箱中取出菌種轉接斜面,，37℃培養(yǎng)24h。 2) 上罐前一天,，由斜面菌種轉接一級種子瓶,， 37℃振蕩培養(yǎng)12h，然后轉接二級種子瓶， 37℃振蕩培養(yǎng)10h,。 1.3上罐前的準備及實罐滅菌 1) 洗凈發(fā)酵罐及各聯接膠管 2) 配制發(fā)酵培養(yǎng)基5.0L,，置發(fā)酵罐內，加入幾滴泡敵,。  3) 校正pH電極和溶氧（DO）電極,。  ) 把電極插口、取樣管,、補料口,、消泡劑料瓶等固定、密封好后,，開夾套出,、進水閥V2、W1,，發(fā)酵罐使夾套充滿水,，用保護罩蓋住罐蓋及發(fā)酵罐，用傾倒螺釘鎖緊法蘭,，開保護罩頂部排氣閥V4,，啟動蒸氣發(fā)生器，啟動攪拌馬達,，調轉速300r/min,，開啟冷凝水出水閥V1，開啟蒸氣閥門S1,，進行在位滅菌,。  5) 當保護罩頂部閥門V4有蒸氣排出時，2min后關閉閥門,，當罐溫接近滅菌溫度時,，微開閥V4適當排氣，并調整蒸氣閥S1維持罐溫,。保溫結束后,，關蒸氣閥S1，全開冷凝水出水閥V1,，開進水閥W3,，發(fā)酵罐將溫度設定在37℃，切入自動,。 6) 當溫度降到100℃以下,，緩緩開排氣閥V4，使保護罩頂壓力表指示為零,，移去保護罩,。  7) 連接通氣管路,，將進氣過濾器K7口與控制臺左側空氣出口連通，開彈簧夾,，接通空氣壓縮機電源,，對發(fā)酵罐進行通氣，調整空氣流量3～5L/min,。  8) 當溫度達到37℃時,，將預先滅菌的pH電極、DO電極（75%酒精消毒,、UV消毒）接入發(fā)酵罐,，連接各電極導線。