發(fā)酵罐使用的時(shí)候怎么確定菌體生長(zhǎng)狀況

發(fā)酵罐為研究小型發(fā)酵罐分批培養(yǎng)過程中大腸桿菌的菌體生長(zhǎng)狀況,，本實(shí)驗(yàn)以分批培養(yǎng)法培養(yǎng)大腸桿菌，通過控制發(fā)酵過程的溫度,、溶氧、攪拌速度、空氣流量,、泡沫水平等參數(shù),，并每小時(shí)取樣測(cè)DO值和還原糖量，制作菌體生長(zhǎng)曲線,，以此判斷大腸桿菌的生長(zhǎng)發(fā)酵狀況,。本實(shí)驗(yàn)選用生長(zhǎng)迅速的大腸桿菌進(jìn)行發(fā)酵罐的培養(yǎng)，同時(shí)定時(shí)地取樣測(cè)定,，包括對(duì)菌體進(jìn)行鏡檢,、測(cè)定不同時(shí)期發(fā)酵液的細(xì)菌濁度以及殘留還原糖的變化發(fā)酵過程中，微生物的生長(zhǎng)呈一定規(guī)律,，掌握微生物生長(zhǎng)曲線,，可以防止菌種老化衰退、防止有害產(chǎn)物積累,、提高發(fā)酵的效率,，對(duì)生產(chǎn)有指導(dǎo)意義。通過測(cè)定生化指標(biāo),，可大體了解菌體生長(zhǎng)曲線,，并在此基礎(chǔ)上采取適當(dāng)措施促進(jìn)微生物生長(zhǎng)。生長(zhǎng)曲線中,，微生物產(chǎn)生代謝產(chǎn)物或抗生素多在對(duì)數(shù)期末期或穩(wěn)定期,，因此可采取方法延長(zhǎng)次期，如通過發(fā)酵罐等方法,，不斷調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值,，去除有害物質(zhì)，增加適量的氣體和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),，使微生物延遲進(jìn)入或不進(jìn)入衰退期,，從而生產(chǎn)出大量的有用的代謝產(chǎn)物。發(fā)酵罐是生化,、食品,、醫(yī)藥、農(nóng)藥,、化工等生產(chǎn)領(lǐng)域的常用設(shè)備,，雖然發(fā)酵罐的類型很多,如自吸式、氣升式等,。但發(fā)酵工廠用得多的還是傳統(tǒng)的通用發(fā)酵罐(機(jī)械攪拌發(fā)酵罐)[2],。發(fā)酵罐配備控制系統(tǒng)，它主要是對(duì)發(fā)酵過程中的各種參數(shù)如溫度,、pH,、溶解氧,、攪拌速度、空氣流量,、補(bǔ)料,、泡沫水平等進(jìn)行設(shè)定、顯示,、記錄以及對(duì)這些參數(shù)進(jìn)行反饋調(diào)節(jié)控制配制培養(yǎng)基 1) 配制種子固體培養(yǎng)基100mL,，分裝試管，0.1MPa滅菌20min,，然后擺成斜面,。 2) 配制種子培養(yǎng)液600mL，分裝50mL于一個(gè)250mL三角瓶中（作一級(jí)種子瓶）,，余下550mL平均分裝于三個(gè)500mL三角瓶中（作二級(jí)種子用）,，同上滅菌。 1.2.2接種與培養(yǎng) 

1) 上罐前兩天,，從冰箱中取出菌種轉(zhuǎn)接斜面,，37℃培養(yǎng)24h。 2) 上罐前一天,，由斜面菌種轉(zhuǎn)接一級(jí)種子瓶,， 37℃振蕩培養(yǎng)12h，然后轉(zhuǎn)接二級(jí)種子瓶,， 37℃振蕩培養(yǎng)10h,。 1.3上罐前的準(zhǔn)備及實(shí)罐滅菌 1) 洗凈發(fā)酵罐及各聯(lián)接膠管 2) 配制發(fā)酵培養(yǎng)基5.0L，置發(fā)酵罐內(nèi),，加入幾滴泡敵,。  3) 校正pH電極和溶氧（DO）電極。  ) 把電極插口,、取樣管,、補(bǔ)料口、消泡劑料瓶等固定,、密封好后,，開夾套出、進(jìn)水閥V2,、W1,，發(fā)酵罐使夾套充滿水，用保護(hù)罩蓋住罐蓋及發(fā)酵罐,，用傾倒螺釘鎖緊法蘭,，開保護(hù)罩頂部排氣閥V4，啟動(dòng)蒸氣發(fā)生器,，啟動(dòng)攪拌馬達(dá),，調(diào)轉(zhuǎn)速300r/min,，開啟冷凝水出水閥V1，開啟蒸氣閥門S1,，進(jìn)行在位滅菌,。  5) 當(dāng)保護(hù)罩頂部閥門V4有蒸氣排出時(shí)，2min后關(guān)閉閥門,，當(dāng)罐溫接近滅菌溫度時(shí)，微開閥V4適當(dāng)排氣,，并調(diào)整蒸氣閥S1維持罐溫,。保溫結(jié)束后，關(guān)蒸氣閥S1,，全開冷凝水出水閥V1,，開進(jìn)水閥W3，發(fā)酵罐將溫度設(shè)定在37℃,，切入自動(dòng),。 6) 當(dāng)溫度降到100℃以下，緩緩開排氣閥V4,，使保護(hù)罩頂壓力表指示為零,，移去保護(hù)罩。  7) 連接通氣管路,，將進(jìn)氣過濾器K7口與控制臺(tái)左側(cè)空氣出口連通,，開彈簧夾，接通空氣壓縮機(jī)電源,，對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行通氣,，調(diào)整空氣流量3～5L/min。  8) 當(dāng)溫度達(dá)到37℃時(shí),，將預(yù)先滅菌的pH電極,、DO電極（75%酒精消毒、UV消毒）接入發(fā)酵罐,，連接各電極導(dǎo)線,。