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操作步驟-凱氏定氮儀
閱讀：1835 發(fā)布時間：2019-9-28操作步驟-凱氏定氮儀
1.采用微電腦進行過程控制，包括手動模式和自動模式,，可根據(jù)您的需要自行設定和切換:
自動模式下:
一次完成加堿,、加硼酸、蒸餾,，氨氣吸收整個過程,，加硼酸和加堿的體積以及蒸餾和吸收過程的時間都可以自行設定。燒結馬弗爐
人工模式下:
加硼,，加堿 和蒸餾吸收三個過程可以單獨人工操作,，體積，時間自行控制,，滿足專業(yè)用戶需求,。
2.大屏幕點陣式液晶顯示,，全中文菜單，觸摸式按鈕,，操作簡捷方便,。
3.自動式蒸餾控制、自動加水,、自動水位控制,、自動停水和水壓過低報警。
4.各種安全保護:消化管安全門裝置,，蒸汽發(fā)生器缺水報警,。
5.可存儲操作程序。
6.儀器外殼采用特制噴塑鋼板,，工作區(qū)域采用ABS防腐板及不銹鋼底板,。
7.防化學試劑腐蝕和機械損壞表面，耐酸耐堿,。
8.水位檢測,、低水位報警，自動斷電,。
9.標配里不含消化爐,，消化爐為選配，建議選擇C型消化爐,。
定氮儀操作流程使用方法
凱氏定氮儀使用方法及操作步驟
一,、消化
1、準備6個凱氏燒瓶,，標號,。1、2,、3號燒瓶中分別加入適當濃度的蛋白溶液1.0mL,，樣品要加到燒瓶底部,，切勿沾在瓶口及瓶頸上,。再依次加入硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g，濃硫酸2.0mL,，30%過氧化氫1.0mL,。4、5,、6號燒瓶作為空白對照,，用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質，對樣品測定進行校正,。4,、5,、6號燒瓶中加入蒸餾水1.0mL代替樣液，其余所加試劑與1,、2,、3號燒瓶相同。
2,、將加好試劑的各燒瓶放置消化架上,，接好抽氣裝置。先用微火加熱煮沸,，此時燒瓶內物質炭化變黑,，并產生大量泡沫，務必注意防止氣泡沖出管口,。待泡沫消失停止產生后,，加大火力，保持瓶內液體微沸,，至溶液澄清后,，再繼續(xù)加熱使消化液微沸15min。實驗室馬弗爐
在消化過程中要隨時轉動燒瓶,，以使內壁粘著物質均能流入底部,，以保證樣品*消化。消化時放出的氣體內含SO2,，具有強烈刺激性,，因此自始自終應打開抽水泵將氣體抽入自來水排出。整個消化過程均應在通風櫥中進行,。消化*后,，關閉火焰，使燒瓶冷卻至室溫,。
二,、蒸餾吸收
蒸餾和吸收是在微量凱氏定氮儀內進行的。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多,，大體上都由蒸氣發(fā)生,、氨的蒸餾和氨的吸收三部分組成。
1,、儀器的洗滌
儀器安裝前,，各部件需經一般方法洗滌干凈，所用橡皮管,、塞須浸在10%NaOH溶液中,，煮約10min，水洗,、水煮10min,，再水洗數(shù)次,，然后安裝并固定在一只鐵架臺上。
儀器使用前,，微量全部管道都須經水蒸氣洗滌,，以除去管道內可能殘留的氨，正在使用的儀器,，每次測樣前,，蒸氣洗滌5min即可。較長時間未使用的儀器,，重復蒸氣洗滌,，不得少于三次，并檢查儀器是否正常,。仔細檢查各個連接處,，保證不漏氣。
首先在蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水,，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,，以避免水中的氨被蒸出而影響結果，并放入少許沸石(或毛細管等),，以防爆沸,。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經插管流入反應室，但玻杯內的水不要放光,，塞上棒狀玻塞,，保持水封，防止漏氣,。
蒸氣發(fā)生后,，立即關閉廢液排放管上的開關，使蒸氣只能進入反應室,，導致反應室內的水迅速沸騰,，蒸出蒸氣由反應室上端口通過定氮球進入冷凝管冷卻，在冷凝管下端放置一個錐形瓶接收冷凝水,。從定氮球發(fā)燙開始計時,，連續(xù)蒸煮5min，然后移開煤氣燈,。管式氣氛爐
沖洗完畢,，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，由于氣體冷卻壓力降低,，反應室內廢液自動抽到反應室外殼中，打開廢液排出口夾子放出廢液,。如此清洗2—3次,，再在冷凝管下?lián)Q放一個盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中,，蒸餾1—2min，觀察錐形瓶內的溶液是否變色,。如不變色,，表示蒸餾裝置內部已洗干凈。移去錐形瓶,，再蒸餾1—2min,，用蒸餾水沖洗冷凝器下口，關閉煤氣燈,，儀器即可供測樣品使用,。
定氮儀操作流程使用方法
2、無機氮標準樣品的蒸餾吸收
由于定氮操作繁瑣,，為了熟悉蒸餾和滴定的操作技術,，初學者宜先用無機氮標準樣品進行反復練習，再進行有機氮未知樣品的測定,。常用巳知濃度的標準硫酸銨測試三次,。 取潔凈的100mL錐形瓶五只，依次加入2%硼酸溶液20mL,，次甲基藍-甲基紅混合指示劑(呈紫紅色)3—4滴,，蓋好瓶口待用。取其中一只錐形瓶承接在冷凝管下端,，并使冷凝管的出口浸沒在溶液中,。
注意:在此操作之前必須先打開收集器活塞，以免錐形瓶內液體倒吸,。準確吸取2mL硫酸銨標準液加到玻杯中,，小心提起棒狀玻塞使硫酸銨溶液慢慢流入蒸餾瓶中，用少量蒸餾水沖洗小玻杯3次,，一并放人蒸餾瓶中,。然后用量筒向小玻杯中加入10mL30%NaOH溶液，使堿液慢慢流入蒸餾瓶中,，在堿液尚未*流入時,，將棒狀玻塞蓋緊。向小玻杯中加約5mL蒸餾水,，再慢慢打開玻塞,，使一半水流入蒸餾瓶，一半留在小玻杯中作水封,。關閉收集器活塞,，加熱蒸氣發(fā)生器，進行蒸餾。
錐形瓶中的硼酸-指示劑混合液由于吸收了氨,，由紫紅色變成綠色,。自變色時起，再蒸餾3—5min,，移動錐形瓶使瓶內液面離開冷凝管下口約lcm,，并用少量蒸餾水沖洗冷凝管下口，再繼續(xù)蒸餾1min,，移開錐形瓶,，蓋好，準備滴定,。 在一次蒸餾完畢后,，移去煤氣燈，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器間的橡膠管,，排除反應完畢的廢液,，用水沖洗小玻杯幾次，并將廢液排除,。如此反復沖洗干凈后,，即可進行下一個樣品的蒸餾。按以上方法用標準硫酸銨再做兩次,。另取2mL蒸餾水代替標準硫酸銨進行空白測定二次,。將各次蒸餾的錐形瓶一起滴定。
3,、未知樣品及空白的蒸餾吸收
將消化好的蛋白樣品三支,，空白對照液三支，依次作蒸餾吸收,。加5mL熱的蒸餾水至消化好的樣品或空白對照液中,，通過小玻杯加到反應室中，再用熱蒸餾水洗滌小玻杯3次,，每次用水量約3mL,，洗滌液一并倒入反應室內。其余操作按標準硫酸銨的蒸餾進行,。
由于消化液內硫酸鉀濃度高而呈粘稠狀,，不易從凱氏燒瓶內倒出，必須加入熱蒸餾水5mL稀釋之,，如果有結晶析出,，必須微熱溶解，趁熱加入玻杯,，使其流入反應室,。此外，還應當注意趁儀器洗滌尚未*冷卻時立即加入樣品或空白對照液，否則消化液通過冷卻的管道容易析出結晶,，造成堵塞,。
定氮儀操作流程使用方法
三,、滴定
樣品和空白蒸餾完畢后,，一起進行滴定。打開接受瓶蓋,，用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的標準鹽酸溶液進行滴定,。待滴至瓶內溶液呈暗灰色時，用蒸餾水將錐形瓶內壁四周淋洗一次,。若振搖后復現(xiàn)綠色,，應再小心滴入標準鹽酸溶液半滴，振搖觀察瓶內溶液顏色變化,，暗灰色在一二分鐘內不變,，當視為到達滴定終點。
若呈粉紅色,，表明已超越滴定終點,，可在已滴定耗用的標準鹽酸溶液用量中減去0.02mL，每組樣品的定氮終點顏色必須*一致,?？瞻讓φ找航邮芷績鹊娜芤侯伾蛔兓蚵杂凶兓形闯霈F(xiàn)綠色，可以不滴定,。記錄每次滴定耗用標準鹽酸溶液毫升數(shù),，供計算用。
從凱氏定氮原理可以知道:凱氏定氮法是將含氮有機物轉變?yōu)闊o機氮硫酸銨來進行檢測,，以得到含氮量的測定值乘以一定系數(shù)得出蛋白質含量,。而含氮有機物不僅僅是蛋白質，還有三聚氰胺等等,。在加上食品中蛋白質含量的現(xiàn)行國家標準和通行測定方法是經典凱氏定氮法,，這就為造假者提供了可乘之機。
蛋白質中的含氮量不超過30%,，三聚氰胺的大的特點是含氮量很高(66%),，溶于水后無色無味，也就是說在一杯清水中加入三聚氰胺,，然后用凱氏定氮法檢測,，結果顯示是含有蛋白質的。由于"凱氏定氮法"只能測出含氮量,并不能鑒定飼料中有無違規(guī)化學物質,所以,添加三聚氰胺的奶粉理論上可以測出較高的蛋白質含量,。