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操作步驟-凱氏定氮儀
閱讀：1491 發(fā)布時(shí)間：2019-9-28操作步驟-凱氏定氮儀
1.采用微電腦進(jìn)行過程控制，包括手動(dòng)模式和自動(dòng)模式,，可根據(jù)您的需要自行設(shè)定和切換:
自動(dòng)模式下:
一次完成加堿,、加硼酸、蒸餾,，氨氣吸收整個(gè)過程,，加硼酸和加堿的體積以及蒸餾和吸收過程的時(shí)間都可以自行設(shè)定。燒結(jié)馬弗爐
人工模式下:
加硼,，加堿 和蒸餾吸收三個(gè)過程可以單獨(dú)人工操作,，體積，時(shí)間自行控制，滿足專業(yè)用戶需求,。
2.大屏幕點(diǎn)陣式液晶顯示,，全中文菜單，觸摸式按鈕,，操作簡捷方便,。
3.自動(dòng)式蒸餾控制、自動(dòng)加水,、自動(dòng)水位控制,、自動(dòng)停水和水壓過低報(bào)警。
4.各種安全保護(hù):消化管安全門裝置,，蒸汽發(fā)生器缺水報(bào)警,。
5.可存儲(chǔ)操作程序。
6.儀器外殼采用特制噴塑鋼板,，工作區(qū)域采用ABS防腐板及不銹鋼底板,。
7.防化學(xué)試劑腐蝕和機(jī)械損壞表面，耐酸耐堿,。
8.水位檢測,、低水位報(bào)警，自動(dòng)斷電,。
9.標(biāo)配里不含消化爐,，消化爐為選配，建議選擇C型消化爐,。
定氮儀操作流程使用方法
凱氏定氮儀使用方法及操作步驟
一,、消化
1、準(zhǔn)備6個(gè)凱氏燒瓶,，標(biāo)號(hào),。1、2,、3號(hào)燒瓶中分別加入適當(dāng)濃度的蛋白溶液1.0mL,，樣品要加到燒瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上,。再依次加入硫酸鉀-硫酸銅接觸劑0.3g,，濃硫酸2.0mL，30%過氧化氫1.0mL,。4,、5、6號(hào)燒瓶作為空白對照,，用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì),，對樣品測定進(jìn)行校正,。4、5,、6號(hào)燒瓶中加入蒸餾水1.0mL代替樣液,，其余所加試劑與1、2,、3號(hào)燒瓶相同。
2,、將加好試劑的各燒瓶放置消化架上,，接好抽氣裝置。先用微火加熱煮沸,，此時(shí)燒瓶內(nèi)物質(zhì)炭化變黑,，并產(chǎn)生大量泡沫，務(wù)必注意防止氣泡沖出管口,。待泡沫消失停止產(chǎn)生后,，加大火力，保持瓶內(nèi)液體微沸,，至溶液澄清后,，再繼續(xù)加熱使消化液微沸15min。實(shí)驗(yàn)室馬弗爐
在消化過程中要隨時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)燒瓶,，以使內(nèi)壁粘著物質(zhì)均能流入底部,，以保證樣品*消化。消化時(shí)放出的氣體內(nèi)含SO2,，具有強(qiáng)烈刺激性,，因此自始自終應(yīng)打開抽水泵將氣體抽入自來水排出。整個(gè)消化過程均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行,。消化*后,，關(guān)閉火焰，使燒瓶冷卻至室溫,。
二,、蒸餾吸收
蒸餾和吸收是在微量凱氏定氮儀內(nèi)進(jìn)行的。凱氏定氮蒸餾裝置種類甚多,，大體上都由蒸氣發(fā)生,、氨的蒸餾和氨的吸收三部分組成。
1,、儀器的洗滌
儀器安裝前,，各部件需經(jīng)一般方法洗滌干凈，所用橡皮管,、塞須浸在10%NaOH溶液中,，煮約10min，水洗、水煮10min,，再水洗數(shù)次,，然后安裝并固定在一只鐵架臺(tái)上。
儀器使用前,，微量全部管道都須經(jīng)水蒸氣洗滌,，以除去管道內(nèi)可能殘留的氨，正在使用的儀器,，每次測樣前,，蒸氣洗滌5min即可。較長時(shí)間未使用的儀器,，重復(fù)蒸氣洗滌,，不得少于三次，并檢查儀器是否正常,。仔細(xì)檢查各個(gè)連接處,，保證不漏氣。
首先在蒸氣發(fā)生器中加約2/3體積蒸餾水,，加入數(shù)滴硫酸使其保持酸性,，以避免水中的氨被蒸出而影響結(jié)果，并放入少許沸石(或毛細(xì)管等),，以防爆沸,。沿小玻杯壁加入蒸餾水約20mL讓水經(jīng)插管流入反應(yīng)室，但玻杯內(nèi)的水不要放光,，塞上棒狀玻塞,，保持水封，防止漏氣,。
蒸氣發(fā)生后,，立即關(guān)閉廢液排放管上的開關(guān)，使蒸氣只能進(jìn)入反應(yīng)室,，導(dǎo)致反應(yīng)室內(nèi)的水迅速沸騰,，蒸出蒸氣由反應(yīng)室上端口通過定氮球進(jìn)入冷凝管冷卻，在冷凝管下端放置一個(gè)錐形瓶接收冷凝水,。從定氮球發(fā)燙開始計(jì)時(shí),，連續(xù)蒸煮5min，然后移開煤氣燈,。管式氣氛爐
沖洗完畢,，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器之間的連接橡膠管，由于氣體冷卻壓力降低,，反應(yīng)室內(nèi)廢液自動(dòng)抽到反應(yīng)室外殼中,，打開廢液排出口夾子放出廢液,。如此清洗2—3次，再在冷凝管下?lián)Q放一個(gè)盛有硼酸-指示劑混合液的錐形瓶使冷凝管下口*浸沒在溶液中,，蒸餾1—2min,，觀察錐形瓶內(nèi)的溶液是否變色。如不變色,，表示蒸餾裝置內(nèi)部已洗干凈,。移去錐形瓶，再蒸餾1—2min,，用蒸餾水沖洗冷凝器下口,，關(guān)閉煤氣燈，儀器即可供測樣品使用,。
定氮儀操作流程使用方法
2、無機(jī)氮標(biāo)準(zhǔn)樣品的蒸餾吸收
由于定氮操作繁瑣,，為了熟悉蒸餾和滴定的操作技術(shù),，初學(xué)者宜先用無機(jī)氮標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行反復(fù)練習(xí)，再進(jìn)行有機(jī)氮未知樣品的測定,。常用巳知濃度的標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨測試三次,。 取潔凈的100mL錐形瓶五只，依次加入2%硼酸溶液20mL,，次甲基藍(lán)-甲基紅混合指示劑(呈紫紅色)3—4滴,，蓋好瓶口待用。取其中一只錐形瓶承接在冷凝管下端,，并使冷凝管的出口浸沒在溶液中,。
注意:在此操作之前必須先打開收集器活塞，以免錐形瓶內(nèi)液體倒吸,。準(zhǔn)確吸取2mL硫酸銨標(biāo)準(zhǔn)液加到玻杯中,，小心提起棒狀玻塞使硫酸銨溶液慢慢流入蒸餾瓶中，用少量蒸餾水沖洗小玻杯3次,，一并放人蒸餾瓶中,。然后用量筒向小玻杯中加入10mL30%NaOH溶液，使堿液慢慢流入蒸餾瓶中,，在堿液尚未*流入時(shí),，將棒狀玻塞蓋緊。向小玻杯中加約5mL蒸餾水,，再慢慢打開玻塞,，使一半水流入蒸餾瓶，一半留在小玻杯中作水封,。關(guān)閉收集器活塞,，加熱蒸氣發(fā)生器,，進(jìn)行蒸餾。
錐形瓶中的硼酸-指示劑混合液由于吸收了氨,，由紫紅色變成綠色,。自變色時(shí)起，再蒸餾3—5min,，移動(dòng)錐形瓶使瓶內(nèi)液面離開冷凝管下口約lcm,，并用少量蒸餾水沖洗冷凝管下口，再繼續(xù)蒸餾1min,，移開錐形瓶,，蓋好，準(zhǔn)備滴定,。 在一次蒸餾完畢后,，移去煤氣燈，夾緊蒸氣發(fā)生器與收集器間的橡膠管,，排除反應(yīng)完畢的廢液,，用水沖洗小玻杯幾次，并將廢液排除,。如此反復(fù)沖洗干凈后,，即可進(jìn)行下一個(gè)樣品的蒸餾。按以上方法用標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨再做兩次,。另取2mL蒸餾水代替標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨進(jìn)行空白測定二次,。將各次蒸餾的錐形瓶一起滴定。
3,、未知樣品及空白的蒸餾吸收
將消化好的蛋白樣品三支,，空白對照液三支，依次作蒸餾吸收,。加5mL熱的蒸餾水至消化好的樣品或空白對照液中,，通過小玻杯加到反應(yīng)室中，再用熱蒸餾水洗滌小玻杯3次,，每次用水量約3mL,，洗滌液一并倒入反應(yīng)室內(nèi)。其余操作按標(biāo)準(zhǔn)硫酸銨的蒸餾進(jìn)行,。
由于消化液內(nèi)硫酸鉀濃度高而呈粘稠狀,，不易從凱氏燒瓶內(nèi)倒出，必須加入熱蒸餾水5mL稀釋之,，如果有結(jié)晶析出,，必須微熱溶解，趁熱加入玻杯,，使其流入反應(yīng)室,。此外,，還應(yīng)當(dāng)注意趁儀器洗滌尚未*冷卻時(shí)立即加入樣品或空白對照液，否則消化液通過冷卻的管道容易析出結(jié)晶,，造成堵塞,。
定氮儀操作流程使用方法
三、滴定
樣品和空白蒸餾完畢后,，一起進(jìn)行滴定,。打開接受瓶蓋，用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液進(jìn)行滴定,。待滴至瓶內(nèi)溶液呈暗灰色時(shí),，用蒸餾水將錐形瓶內(nèi)壁四周淋洗一次。若振搖后復(fù)現(xiàn)綠色,，應(yīng)再小心滴入標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液半滴,，振搖觀察瓶內(nèi)溶液顏色變化，暗灰色在一二分鐘內(nèi)不變,，當(dāng)視為到達(dá)滴定終點(diǎn),。
若呈粉紅色，表明已超越滴定終點(diǎn),，可在已滴定耗用的標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液用量中減去0.02mL，每組樣品的定氮終點(diǎn)顏色必須*一致,?？瞻讓φ找航邮芷績?nèi)的溶液顏色不變或略有變化尚未出現(xiàn)綠色，可以不滴定,。記錄每次滴定耗用標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液毫升數(shù),，供計(jì)算用。
從凱氏定氮原理可以知道:凱氏定氮法是將含氮有機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)氮硫酸銨來進(jìn)行檢測,，以得到含氮量的測定值乘以一定系數(shù)得出蛋白質(zhì)含量,。而含氮有機(jī)物不僅僅是蛋白質(zhì)，還有三聚氰胺等等,。在加上食品中蛋白質(zhì)含量的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)和通行測定方法是經(jīng)典凱氏定氮法,，這就為造假者提供了可乘之機(jī)。
蛋白質(zhì)中的含氮量不超過30%,，三聚氰胺的大的特點(diǎn)是含氮量很高(66%),，溶于水后無色無味，也就是說在一杯清水中加入三聚氰胺,，然后用凱氏定氮法檢測,，結(jié)果顯示是含有蛋白質(zhì)的。由于"凱氏定氮法"只能測出含氮量,并不能鑒定飼料中有無違規(guī)化學(xué)物質(zhì),所以,添加三聚氰胺的奶粉理論上可以測出較高的蛋白質(zhì)含量,。