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技術(shù)文章

HJ-2型黃曲梅素測(cè)定儀操作步驟

閱讀:1129          發(fā)布時(shí)間:2017-7-26

HJ-2型黃曲梅素測(cè)定儀操作步驟

一,、 工作原理

本裝置采用薄層層析方法,樣品中黃曲梅毒素B1經(jīng)提取濃縮薄層分離后,,在波長(zhǎng)365nm紫外光下產(chǎn)生紫色熒光,,根據(jù)其在薄層上顯示熒光的低檢測(cè)量來(lái)測(cè)定含量。

二,、 技術(shù)參數(shù)

檢測(cè)樣品:糧食,、飲料、水果、肉類(lèi),、魚(yú)蝦類(lèi)發(fā)酵產(chǎn)品,;

低檢測(cè)量:0.0004微克;

工作電壓:交流220V,,50Hz,;

烘板器:加熱面積220mmX200mm,功率600W

        重量6kg,,

        外形尺寸:270mmX235mmX150mm,;

點(diǎn)樣器:點(diǎn)樣直徑<3mm,

        工作尺寸:200mmX200mm,,

        重量8kg,,

        外形尺寸:280mmX245mmX315mm;

觀察箱:紫外光波365nm,,功率12W,,

        重量11kg,

        外形尺寸:300mmX310mmX445mm,。

 

三,、 操作方法

1、 準(zhǔn)備工作

(1) 薄層板的制備:薄層板一般采用表面光滑的玻璃板在板面上涂有一層0.25-0.5mm的吸附劑而成,。玻璃板要求厚度均勻,,平整、清潔(薄層板無(wú)規(guī)格,,常用5×15,,8×15,10×20,,20×20等規(guī)格),。

將準(zhǔn)備的薄層板洗滌清潔后、風(fēng)干或烘干,。制板前用浸有乙醇的脫脂棉擦凈,。

(2) 調(diào)漿:調(diào)漿是薄層板是否能制成功的關(guān)鍵,,吸附劑用量根據(jù)制備厚度來(lái)確定,,一般厚度為0.258-0.3mm,5×15cm板需吸附劑1克,,8×15cm板需1.5-1.6克,。取吸附劑一份于小型研缽中加二份水迅速研磨,研磨后再加一份水繼續(xù)研磨(或一次加足),,當(dāng)漿液開(kāi)始調(diào)稠時(shí),,立即涂布(加CMC可一次涂若干塊)。漿吸附劑均勻地鋪在玻璃板上。

2,、 活化:活化的作用是調(diào)節(jié)吸附劑的含水量,,以得到適宜的活性,將涂布好的薄層板待自然晾干后,,放入烘箱內(nèi),,溫度調(diào)節(jié)到100℃左右,置二小時(shí),,將薄層板取出,,置入干燥器中備用,三天后要把薄層板重新活化或臨用前放在烘板器上活化20-30分鐘(溫度控制在80℃),,即可適用,。

3、 點(diǎn)樣:使點(diǎn)樣液滴在制好的薄層板上,,把微量注射器(常用規(guī)格0.5,、1.5、10,、100微升,,可根據(jù)需要選用)固定在點(diǎn)樣器的固定架上,即可上,、下,、左、右點(diǎn)樣,。微量注射器是薄層點(diǎn)樣常用的工具,,洗滌是用有機(jī)溶劑,不能用堿洗,。使用時(shí)刻將微量注射器針頭稍磨平,,操作時(shí)給予一定沖力,同時(shí)開(kāi)啟冷風(fēng)邊點(diǎn)邊吹干,。樣點(diǎn)滴加在薄層板上位置,、距底、距側(cè)及兩點(diǎn)之間的距離均應(yīng)大于1.5cm,,原點(diǎn)尖應(yīng)同一原始線(xiàn)上,,大小應(yīng)基本一致。將活化點(diǎn)的薄層板放在點(diǎn)樣器上,,對(duì)好距離,,開(kāi)啟背景燈,然后將吸有樣液的微量注射器固定好,,開(kāi)啟冷風(fēng),,然后輕輕壓下微量注射器邊點(diǎn)邊吸干,圓點(diǎn)直徑控制在3mm以?xún)?nèi)。

4,、 展開(kāi):將點(diǎn)好樣液的薄層板,,放置在放有溶劑的展干燥缸中、使樣點(diǎn)在展開(kāi)劑的移動(dòng)下進(jìn)行分層,。

5,、 顯色:熒光箱采用紫外光線(xiàn)照射法,使帶熒光的物質(zhì)可直接在紫外燈下觀察斑點(diǎn)位置,。開(kāi)啟燈箱后,,即可適用,不需預(yù)熱,。黃曲梅毒素低檢出量為0.0004微克,,儀器觀察口涂有保護(hù)膜能有效地保護(hù)操作人員視力免受紫外光照射。

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