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Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G
由于螢火蟲熒光素酶的超靈敏性，快速和易于使用的體系,，在研究基因表達(dá)方面螢火蟲熒光素酶是zui常用的報(bào)告基因之一,。熒光素酶被用來監(jiān)測細(xì)菌,，培養(yǎng)細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因植物或動物的啟動子活性反應(yīng),。熒光素酶是一個61kDa大小的蛋白，它的活性形式是單體,，且不需要其它的加工修飾,。

Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G

 

生物發(fā)光反應(yīng)

幾個因素將會影響反應(yīng)的靈敏度，包括溫度,，pH或底物濃度,。為得到*結(jié)果，在使用之前我們建議用pH7.8的緩沖液,，并且所有試劑在室溫下預(yù)熱,。為充分反應(yīng)，我們建議在分析緩沖液中加入過量的ATP和Mg²⁺,。

當(dāng)熒光素加入到熒光素酶樣品中,，會看到瞬間閃光在0.3-0.5秒內(nèi)達(dá)到峰值強(qiáng)度,。這光將隨著半衰期0.5-1.0分鐘左右很快消失。但是初始如果在分析buffer中加入輔酶A,，將能阻止快速反應(yīng)延長半衰期至2-5分鐘,。如果在反應(yīng)混合液中后加輔酶A，將促進(jìn)額外的,，次級發(fā)光（Fraga, 2008）,。

在Gold Bio，我們建議用以Yuichi Oba, et al. (2003)為基礎(chǔ)的熒光素酶分析buffers：

-100mM Tris- HCl(pH7.8)

-5mM MgCl₂

-250 uM CoA

-150 uM ATP(Fraga, 2008)

-150 ug/ml d-Luciferin

一些研究者在分析buffer中也加入其它成份,，比如DTT或EDTA(Steghans, 1998),。根據(jù)您具體需要可以適當(dāng)調(diào)整分析buffer。為得到zuijia結(jié)果,，根據(jù)您具體細(xì)胞我們建議先做一個動力學(xué)曲線的初步測試,。

產(chǎn)品具體信息

D-熒光素鉀鹽

4，5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt

KC₁₁H₇N₂O₃S₂

分子量：318.42 g/mol

D-熒光素鈉鹽

4,，5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt

NaC₁₁H₇N₂O₃S₂.H₂O

分子量：320.32 g/mol

 

儲存：-20℃避光保存,。

 

Goldbio 熒光素鉀/鈉鹽 LUCK-1G