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技術(shù)文章

goldbio-活體成像技術(shù)以及相關(guān)產(chǎn)品對比

閱讀:1593          發(fā)布時間:2021-8-11

活體成像技術(shù)

早在1999年由美國哈佛大學Weissleder博士*提出了分子影像學(molecular imaging,,MI)的概念,即應用影像學的方法對活體狀態(tài)下的生物過程進行細胞和分子水平的定性和定量研究,。活體成像便是基于分子影像學孕育而生的,,通過這個成像系統(tǒng),可以觀測活體動物體內(nèi)腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移,,感染性疾病的發(fā)展進程,,特定基因的表達等生物學過程

活體成像技術(shù)主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)熒光(fluorescence)兩種技術(shù),。

生物發(fā)光是用熒光素酶基因標記細胞或DNA,。

熒光技術(shù)則采用熒光報告基團(GFP、RFP, Cyt及dyes等)進行標記,。

這一技術(shù)對腫瘤微小轉(zhuǎn)移灶的檢測靈敏度*,不涉及放射性物質(zhì)和方法, 非常安全,。操作極其簡單,、所得結(jié)果直觀、靈敏度高,。

 

活體成像兩種檢測技術(shù)介紹

活體成像

特點

優(yōu)點

缺點

生物發(fā)光檢測

bioluminescence

熒光素酶(Luciferase)對基因,、細胞和活體動物進行標記

熒光素酶催化底物(例如熒光素鉀鹽)反應后,,會產(chǎn)生化學發(fā)光。這種光是由化學反應而來,,不需要激發(fā)光,;

標記方法是通過克隆技術(shù),將熒光素酶的基因插入到預期觀察的細胞染色體內(nèi),,通過對克隆細胞進行篩選,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達熒光素酶的細胞株,。再將細胞株轉(zhuǎn)移至特定的小鼠體內(nèi)形成模型

特異性強,,無自發(fā)熒光

★高靈敏度,,在體內(nèi)可檢測到幾百個細胞,,檢測的深度在3-4cm;

★定量精確

 

★信號較弱,,檢測時間較長;★儀器精密度要求較高,;

★細胞或基因需要轉(zhuǎn)基因標記,;

★不可用于人體,不適用于抗體,、多肽等標記

熒光檢測

fluorescence

采用熒光報告基因 (GFP,、RFP等) 或熒光染料進行標記

★需要外接激發(fā)光源,,利用報告基因,、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光,就可以形成體內(nèi)的生物光源,。

★熒光染料,、蛋白標記能力強;

★信號強,,成像速度快,,操作簡便,實驗成本較低,;

★未來可用于人,;

★適用范圍廣,可以是動物,、細胞,、微生物,也可以是抗體,、藥物,、納米材料等

★存在自發(fā)熒光,影響靈敏度,;

★光容易被動物組織吸收,;

★檢測深度受限;

★背景光干擾,,定量準確度低

★生物發(fā)光檢測技術(shù)相關(guān)試劑和推薦品牌(以2020年價格為例比較)

熒光素酶及對應底物

底物產(chǎn)品品牌 (Goldbio)

底物產(chǎn)品品牌 (Biotium)

底物產(chǎn)品品牌(Bio-world)

底物產(chǎn)品品牌(sigma)

螢火蟲熒光素酶firefly luciferase/底物D-Luciferin

(D-熒光素)

 

 

 

 

 

D-Luciferin, Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

D-Luciferin,Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

D-Luciferin, Potassium Salt(D-熒光素鉀鹽)

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40400076-1/50mg

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D-Luciferin, Sodium Salt(D-熒光素鈉鹽)

D-Luciferin,Sodium Salt(D-熒光素鈉鹽)

無鈉鹽

D-Luciferin, Sodium Salt(D-熒光素鈉鹽)

LUCNA-100mg

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L6882-10mg

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$186



L6882-50mg

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LUCNA-1g

$254($199)

#10102-2/1G

$633



L6882-100mg

$1880

D-LuciferinFirefly,free acid (熒光蟲熒光素游離酸)

D-Luciferin, Free Acid(D-熒光素游離酸)

 

D-Luciferin Free Acid(D-熒光素游離酸)

 

D-Luciferin

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海腎熒光素酶Renilla luciferase/ Coelenterazine(腔腸素)

Coelenterazine(天然腔腸熒光素)

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Coelenterazine, native(天然腔腸熒光素)

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Coelenterazine 400 a

Coelenterazine 400a



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★螞蟻淘常年現(xiàn)貨LUCK-1G

 

 

 

★活體技術(shù)熒光檢測

熒光蛋白標記

適用于標記細胞,、病毒、基因等,,通常使用的是 GFP,、EGFP、RFP(DsRed)等,;


熒光染料標記

適用于標記抗體,、多肽、小分子藥物等,;常用的有 Cy3,、Cy5、Cy5.5 及 Cy7


量子點標記(新的標記方法)

適用于標記腫瘤,,主要應用在活細胞實時動態(tài)熒光觀察與成像,;

量子點(quantum dot) 是一種能發(fā)射熒光的半導體納米微晶體,外觀恰似一極小的點狀物,。量子點熒光比有機熒光染料的發(fā)射光強的 20 倍,,穩(wěn)定性強 100 倍以上,具有熒光發(fā)光光譜較窄,、量子產(chǎn)率高,、不易漂白、激發(fā)光譜寬,、顏色可調(diào),,并且光化學穩(wěn)定性高,不易分解等諸多優(yōu)點,。


 


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