改良科瑪嘉O157顯色培養(yǎng)基使用說明書

組分

科瑪嘉O157顯色培養(yǎng)基一瓶,，添加劑A和B各一支,。

瓊脂 15.0 g/L   蛋白胨和酵母粉 13.0 g/L   色素1.2 g/L

pH值 6.9±0.2℃

操 作
1,、取瓶內(nèi)干粉29.2g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中,，充分攪拌混勻,。也可根據(jù)需要按照29.2 g/L的比例擴大或縮小制備培養(yǎng)基的量,。

2,、加熱至100℃,，不停攪拌，使其*溶解,。切勿加熱超過100℃,，切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱，應(yīng)將培養(yǎng)基加熱沸騰,，立即移出,，輕輕搖勻，再放入微波爐加熱,，觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀?，直?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出,。
3,、加熱后的培養(yǎng)基冷卻至45℃~50℃，輕輕地搖動均勻,，傾注平皿,，使其凝固，晾干備用,。

對于污染較為嚴重的樣品,，使用添加劑可增強CHROMagar O157顯色培養(yǎng)基的選擇性：

       在添加劑A中加入1ml無菌水，在添加劑B中加入1ml 95%乙醇,，輕輕搖動或放置于37℃水浴中,，待內(nèi)容物全部溶解方可使用。然后以無菌操作分別加入到冷卻至45℃~50℃的培養(yǎng)基中,，輕輕混勻,。（添加劑A、B各1ml,，用于1000ml培養(yǎng)基,，可按比例放大或縮小，剩余的添加劑可以保存在-20℃冰箱中,，有效期為半年）,。

保存  該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內(nèi)貯存2周（2℃~8℃，避光）,。

接種

劃線或涂布接種（冰箱內(nèi)保存的平板使用前應(yīng)恢復至室溫）,，在36

±1℃恒溫條件下有氧培養(yǎng)18-24h。

結(jié)果

性能及局限

   大腸桿菌O157靈敏度為98%（Bettelheim et al. 1998）。但缺乏亞碲酸鉀時,，各種非大腸桿菌O157菌株可以出現(xiàn)相同顏色的菌落（如沙門氏菌）,。建議通過乳膠試驗驗證可疑菌落。大腸桿菌O157的鑒定需要做血清學實驗,。

貯存條件

干粉需保存于15℃~30℃干燥環(huán)境中,，在有效期前使用,。

污染處理

使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規(guī)定丟棄,。

附：供體外診斷使用,，產(chǎn)品須專業(yè)人員操作。