酶標儀的工作原理及結(jié)構(gòu)
由酶聯(lián)免疫吸附實驗法可知,,酶標儀應(yīng)該用比色法來分析抗原或抗體的含量,即它應(yīng)依照比色原理進行工作,。實際上,,酶標儀就是一臺變相的光電比色計或分光光度計,,其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計幾乎相同,。圖1是一種單通道,、自動進樣的酶標儀的工作原理圖。
圖1 酶標檢測儀工作原理圖
光源燈發(fā)出的光線經(jīng)過濾光片或單色器后,,成為一束單色光束。該單色光束經(jīng)過塑料微孔板中的待測標本,,被標本吸收掉一部分后,,到達光電檢測器。光電檢測器將投射到其上面的光信號的強弱變成電信號的大小,。此電信號經(jīng)前置放大,、對數(shù)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換等模擬信號處理后,,送入微處理器進行數(shù)據(jù)處理和計算,。zui后由顯示器和打印機將測試結(jié)果顯示、打印出來,。
微處理機還通過控制電路來控制X,、Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)的運動。但對于非自動型的酶標儀,,它是用手工來移動微孔板的,,可以省去X、Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)及其電路,,這樣的儀器體積更小,,結(jié)構(gòu)也更簡單。
微孔板是一種用來盛裝待測樣本的透明塑料板,,板上有多排小孔,,如有40孔板,、55孔板和96孔板等多種規(guī)格。每個小孔可以盛放零點幾毫升的溶液,。根據(jù)儀器的不同,,既可以一個孔一個孔地檢測,也可以一排孔一排孔地檢測,。
酶標儀既可以使用和分光光度計相同的單色器,,也可以使用干涉濾光片來獲得單色光。和光電比色計一樣,,使用濾光片作過濾裝置時,,將濾光片設(shè)計到微孔板的前面和后面效果是一樣的。
圖2是一種酶標儀的光路系統(tǒng),。光源燈發(fā)出的光,,經(jīng)過聚光鏡、光闌后,,到達反射鏡,,經(jīng)反射鏡作90o反射后,垂直通過比色液,,然后再經(jīng)濾光片到達光電管,。
圖2 一種酶標儀光路系統(tǒng)
一般酶標儀的光束既可以設(shè)計成從上到下通過比色液,也可以設(shè)計成從下到上通過比色,。
由酶標儀的工作原理方框圖和光路圖可以看出,,它和普通光電比色計的不同之處在于:一是盛裝比色液的容器不是使用比色皿,而是使用了塑料微孔板,,塑料微孔板常用透明的聚乙烯材料制作,,之所以采用塑料微孔板來作固相載體,是利用它對抗原或抗體有較強的吸附這一特點,;二是酶標儀的光束是垂直通過待測液的,;三是酶標儀通常不使用A而是使用光密度OD來表示吸光度。
酶標儀有單通道和多通道兩種類型,,單通道又分為自動型和手動型兩種,。其中,自動型的儀器設(shè)有X和Y兩個方向的驅(qū)動機構(gòu),,在機械裝置的驅(qū)動下,,微孔板上的小孔一個個依次進入光束下面測試。手動型靠手移動微孔板來進行測量,。
在單通道酶標儀的基礎(chǔ)上,,又發(fā)展了多通道、全自動型酶標儀,。多通道酶標儀一般都是自動型的,,它設(shè)有多個光束和多個光電檢測器,。如8通道的儀器,設(shè)有8條光束(或8個光源),、8個檢測器和8個放大器,。在機械驅(qū)動裝置的作用下,樣品被8個一排,、8個一排檢測,。多通道酶標儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,,價格也較貴,,多用于大中型醫(yī)院。
酶標儀的其他部分的結(jié)構(gòu),,與光電比色計和小型生化分析儀基本相同,。