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Von kossa染色

一,、 實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,，自來水洗,，蒸餾水洗三遍。
2,、硝酸銀反應(yīng)：切片滴加硝酸銀溶液,，用紫外燈連續(xù)照射2-3小時，蒸餾水洗多遍,；
3,、蘇木素染色：切片入蘇木素染液染3-5min，自來水洗,，分化液分化,，自來水洗，返藍(lán)液返藍(lán),，流水沖洗,。
4,、伊紅染色：85%、95%的酒精梯度脫水各5min,，入伊紅染液5min,；
5、脫水封片：切片依次放入無水乙醇I 5min -無水乙醇II 5min-無水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,，中性樹膠封片,。
6、顯微鏡鏡檢,，圖像采集分析,。
二、染色判讀：
鈣鹽沉積區(qū)域呈黑色或棕黑色,，細(xì)胞核呈藍(lán)色,，背景呈紅色。
三,、注意事項：
1,、硝酸銀溶液滴染前，切片必須用蒸餾水洗干凈,；
2,、如果沒有紫外燈，也可以用強太陽光照射,。
 

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